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角膜における骨髄由来幹細胞の機能解析

角膜中骨髓干细胞的功能分析

基本信息

批准号：
18791306
负责人：
中村隆宏
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Doshisha University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791306/
关键词：
角膜骨髄幹細胞可塑性 GFP 抗原提示細胞

项目摘要

GFPトランスジェニックマウスより骨髄を採取し、Lin(-),Sca-1(+),c-kit(+)等の細胞表面マーカーで造血幹細胞群を分離抽出した。あらかじめ放射線照射した同系新生児マウス(C57BL/6)に分離した造血幹細胞を顔面静脈より移植し、2週後に末梢血中のGFP陽性白血球を確認後、造血幹細胞移植モデルとして使用した。同時に、コントロールとして、全骨髄のみを抽出・移植して骨髄移植モデルを作成した。移植後のマウス角膜、強膜に分布する造血幹細胞・骨髄細胞由来GFP陽性細胞の経時的変化を蛍光前眼部撮影装置を用いて経過観察し、定量解析を行った。その結果、角膜に分布するGFP陽性細胞は移植後2ヶ月まで漸増し、その後6ヶ月までは平衡状態を保った(100cells/mm^2)。次に移植したマウス角膜組織における造血幹細胞・骨髄細胞由来GFP陽性細胞の分布の詳細な特徴を組織学的側面から考察を加えた。GFP陽性細胞の角膜上皮、実質、内皮での分布傾向を経時的に観察し統計学的処理を行った。その結果、両移植もモデルともに、陽性細胞の出現頻度は周辺部角膜実質が約25%と最も多く、中央部角膜実質は約8%であった。強膜に分布するGFP陽性細胞は全細胞の約18-28%であった。さらに、GFP陽性細胞の細胞生物学的特徴を免疫組織化学染色法を用いて行った。具体的には、抗原提示細胞マーカー(CD11c,CD11b)で免疫染色を行いGFPと二重染色される細胞の部位、分布および比率等を比較検討した。その結果、両移植モデルともにCD11cと比較してCD11bと二重染色されたGFP陽性細胞が約50%前後と多かった。また、強膜においても、前述の二重染色された陽性細胞が同様に観察された。以上の結果より、骨髄由来幹細胞は、マウス角膜、強膜組織に広く分布し、その細胞の多くはマクロファージ系の細胞群であることがわかった。

Hematopoietic stem cell populations were isolated from cell surfaces such as GFP, Lin(-),Sca-1(+),c-kit(+), etc. Hematopoietic stem cells were isolated and transplanted into the facial vein after irradiation with radiation from a syngeneic newborn Mausu (C57BL/6). After 2 weeks, GFP-positive white blood cells in the peripheral blood were confirmed, and hematopoietic stem cell transplantation was performed. At the same time, the whole bone graft was extracted and transplanted. The distribution of hematopoietic stem cells and bone marrow cells in cornea and membrane after transplantation was examined and quantitatively analyzed by ocular imaging device before transplantation. The results showed that the distribution of GFP positive cells in cornea gradually increased 2 months after transplantation, and maintained equilibrium (100 cells/mm^2) 6 months after transplantation. The detailed characteristics of the distribution of GFP positive cells from hematopoietic stem cells and bone marrow cells were investigated in detail. The distribution tendency of GFP positive cells in corneal epithelium, cytoplasm and endothelium was observed and statistically analyzed. Results: The frequency of positive cells was about 25% in peripheral cornea and 8% in central cornea. Strong membrane distribution of GFP positive cells was observed in approximately 18-28% of the total cells. Immunohistochemical staining was used to characterize the cytobiological characteristics of GFP positive cells. The specific antigen and antigen prompt cells (CD11c, CD11b), immunostaining for GFP and double staining for the location, distribution and ratio of cells were compared. CD11c and CD11b double staining were observed in about 50% of GFP positive cells. The positive cells were observed in the same way as the double staining described above. As a result, stem cells from bone marrow are distributed in cornea and membrane tissues, and many cells are distributed in cell lines.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Neural Conversion of Embryonic Stem Cells by an Inductive Activity on Human Amniotic Membrane Matrix.

通过人羊膜基质的诱导活性进行胚胎干细胞的神经转化。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Proceeding of the National Academy of Science of the United States id America 103
影响因子：
0
作者：
Youji;Kurihara;Kazuyoshi;Ueda;Makoto Ikeya;Morio Ueno
通讯作者：
Morio Ueno

Identification of resident and inflammatory bone marrow derived cells in the sclera by bone marrow and hematopoietic stem cell transplantation.

通过骨髓和造血干细胞移植鉴定巩膜中的常驻和炎性骨髓衍生细胞。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Br J Ophthalmol. 91
影响因子：
0
作者：
Hisatomi T;Sonoda KH;Ishikawa F;Qiao H;Nakamura T;Fukata M;Nakazawa T;Noda K;Miyahara S;Harada M;Kinoshita S;Hafezi-Moghadam A;Ishibashi T;Miller JW.
通讯作者：
Miller JW.

再生医学による重症角膜疾患の新規治療法開発への戦略的研究.

利用再生医学开发严重角膜疾病新疗法的战略研究。