口腔トレポネーマの歯周組織構成細胞侵入機構に関する分子生物学的研究

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本研究では、口腔トレポネーマによる歯周組織構成細胞への侵入機構を明らかにすることを目的として、これら細菌の侵入にかかわる宿主細胞のタンパク質分子の動態ならびに関連する細菌菌体外膜タンパク質について探索した。本年度は以下の結果が得られた。1.口腔トレポネーマであるTreponema mediumの蛍光標識とフローサイトメトリーにより、同菌の歯肉上皮細胞への侵入を検出した。その結果、昨年度行ったRT-PCR法による検出と同様に、共培養後2時間に細胞内T. mediumのピークがみられた。2.蛍光顕微鏡および共焦点レーザー顕微鏡による検討の結果、T. mediumとヒト歯肉上皮細胞上の接着分子ICAM-1の共在がみられた。3. T. mediumとICAM-1の共在がみられたので、同菌の侵入に対するICAM-1の関与をさらに検討した。その結果、RNA干渉法によりICAM-1発現をノックダウンした歯肉上皮細胞へのT. medium侵入は正常歯肉上皮細胞の場合と比較して著しく減少した。一方、Toll-like receptor 2ノックダウン歯肉上皮細胞では同菌の侵入減少はみられなかった。以上の結果から、T. mediumの歯肉上皮細胞への侵入にICAM-1が関与することが示唆された。昨年度に見出した同菌外膜タンパク質によるICAM-1発現の増強と合わせて、この接着分子は慢性歯周炎の発症と進行に重要であることが考えられる。