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酵素変換による高感度検出法を用いる微生物由来新規生理活性環状ジペプチド類の探索

使用基于酶转化的高灵敏度检测方法寻找源自微生物的新型生物活性环状二肽

基本信息

批准号：
07F07431
负责人：
神崎浩
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

放線菌Streptomycs albulus KO23株が生産する環状ジペプチド酸化酵素(CFLoxidase)が環状ジペプチドに対して,非常に幅広い特異性を示すこと,その反応生成物,脱水素型環状ジペプチドが特徴的なUVスペクトルを示すことから,酵素反応とDAD-HPLC法を組み合わせることで、環状ジペプチドを効率よく検出する方法を確立した。平成19年度の研究において,その検出法をより簡便で高感度にする手法へと改善し,平成20年度はこの方法を用いて,微生物および植物抽出物を探索源として環状ジペプチドの検索を行い,幾つかの抽出物中に酵素反応を受ける化合物の存在を認めた。今年度はまず,環状ジペプチドと予測される化合物の存在を認めた数種の糸状菌抽出物のうち,鰹節生産に用いられる糸状菌Aspergillus repensの培養抽出物から,目的化合物を単離し,脱水素型環状ジペプチドneoechinilin Aと同定した。さらにこの化合物を基質としたCFLoxidaseによる変換反応で得られるneoechinilin Bを単離した。これらの化合物の細胞分裂阻害活性を測定し,環状ジペプチド類の構造活性相関に関して新たな知見を得た。すなわち,これらの化合物に共通するTrp残基に置換しているイソプレニル基が,細胞分裂阻害活性の発現に重要であることが判明した。また,CFLoxidaseによる酵素反応を受ける化合物の存在を認めたマツ培養細胞抽出物から,目的化合物の単離精製に成功した。

Actinomycetes Streptomycs albulus KO23 strain produces CFL oxidase (CFLoxidase).ペプチドに対して, very specific に亃いをすこと, その reaction product, dehydrin type ring The unique UV light source of UV light, enzyme reaction DAD-HP The LC method is a combined method and the cyclic method is established. 2019's research and development, 2019's research and development, 2019's research and development, 2019's research and development, 2019's research and development, and 2019's research and development We have discovered the source of the cyclic ジペプチドの検SO を行い of the および plant extract, and recognized the presence of the にenzyme in the つかの extract and the ける compound. This year, the presence of cyclic glucosamine compounds has been predicted, and several kinds of strand-shaped bacteria extracts have been identified, and bonito festival production has been carried out using the strand-shaped bacteria Aspergillus. The culture extract of repens is the same as the target compound, and the dehydrin-type cyclic neoechinilin A is the same. The compound of さらにこの is the matrix of としたCFLoxidaseによる変 in exchange for the reaction 応でgets られるneoechinilin Bを単利した. The cell division-inhibiting activity of これらの compounds was measured, and the structural activity of the cyclic ジペプチド class was correlated with the new ones. The substitution of the Trp residue is common among the compounds of the すなわち and the これらの compounds. It was discovered that the importance of cell division inhibitory activity was revealed in the research on the プレニルが.また, CFLoxidase enzyme reacts with the presence of the ける compound and recognizes the presence of the compound in cultured cell extracts. The target compound is isolated and purified successfully.