TRAILによる細胞死誘導機構の解析とその耐性の克服

TRAIL诱导细胞死亡机制分析及克服其耐药性

• 批准号: 07J01621
• 负责人: 田中 浩
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J01621/
• 关键词: がん; 耐性; シグナル伝達; アポトーシス

代表者は、がん細胞におけるTRAIL誘導性細胞死の解明を目的として、質量分析を用いTRAIL受容体の新規結合タンパク質PRMT5を見出した。このPRMT5はTNFRスーパーファミリーの中でもTRAIL受容体であるDR4/DR5と選択的に結合した。PRMT5を標的とするsiRNAを導入した各種がん細胞ではTRAILによる細胞毒性が増加したが、正常線維芽細胞株では感受性化は認められなかった。また、PRMT5を安定発現するHCTIl6細胞を樹立したところ、TRAILへの耐性を示した。以上より、がん細胞においてPRMT5はTRAILが誘導する細胞死を抑制していることが明らかになった。さらに、PRMT5ノックダウン時にはTRAILが誘導するlkappaBalpha分解が阻害されることを見出した。このlkappaBalpha分解阻害は、上流のIKK複合体のキナーゼ活性抑制に起因することと、TNF処理時には見られず、TRAIL刺激選択的であることが示唆された。次に、IkappaBalphaの下流に位置するNF-kappaBの活性化を定量した。TRAILによるNF-kappaB活性化はPRMT5ノックダウンにより顕著に減弱したが、 TNF刺激では大きな変化は見られなかった。さらに、PRMT5をノックダウンしたHT1080細胞にGFPタグを付加した活性化型のIKKbetaを遺伝子導入したところ、活性化型IKKbetaの発現はTRAILによるアポトーシスを大幅に減少させた。これらの結果から、PRMT5はNF-kappaBの活性化を介してTRAILによるアポトーシスを阻害していることが考えられる。TRAILの臨床応用を進める上では、一部のがん細胞が示す耐性の克服が大きな課題となる。本研究の成果から、PRMT5を分子標的とすることによってTRAILの抗腫瘍効果を選択的に増強できる可能性が期待される。

Representatives は, が ん cells に お け る TRAIL induced cell death の interpret を purpose と し て, quality analysis を い TRAIL by let body の new rules combined with タ ン パ ク qualitative PRMT5 を shows し た. こ の PRMT5 は TNFR ス ー パ ー フ ァ ミ リ ー の in で も TRAIL by let body で あ る DR4 / DR5 と sentaku に combined し た. PRMT5 を mark と す る siRNA を import し た various が ん cells で は TRAIL に よ る cytotoxicity が raised plus し た が, normal line d bud cell lines で は susceptibility change は recognize め ら れ な か っ た. ま た, PRMT5 を settle 発 now す る を HCTIl6 cells establish し た と こ ろ, TRAIL へ の patience を shown し た. Above よ り, が ん cells に お い て PRMT5 は TRAIL が induced す る cell death を inhibit し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. さ ら に, PRMT5 ノ ッ ク ダ ウ ン when に は TRAIL が induced す る lkappaBalpha decomposition が resistance against さ れ る こ と を shows し た. こ の lkappaBalpha decomposition resistance against は, high-class の IKK complex の キ ナ ー ゼ activity of に cause す る こ と と, TNF 処 when に は see ら れ ず, TRAIL stimulate sentaku で あ る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder2 NF-kappaB <s:1> activation を quantification た た at the に position downstream of the <s:1> IkappaBalpha. TRAIL に よ る NF kappaB activity to は PRMT5 ノ ッ ク ダ ウ ン に よ り 顕 weakened the に し た が, TNF stimulation で は big き な variations change は see ら れ な か っ た. さ ら に, PRMT5 を ノ ッ ク ダ ウ ン し た HT1080 cells に GFP タ グ を plus し た activation type の IKKbeta を posthumous son 伝 import し た と こ ろ, active type IKKbeta の 発 は now TRAIL に よ る ア ポ ト ー シ ス を に substantially reduce さ せ た. こ れ ら の results か ら, PRMT5 は NF - kappaB の activeness を interface し て TRAIL に よ る ア ポ ト ー シ ス を resistance against し て い る こ と が exam え ら れ る. On the TRAIL の clinical 応 を into め る で は, a の が が ん cells in す patience の overcome が big き な subject と な る. This study achievements of の か ら, PRMT5 を molecular mark と す る こ と に よ っ て TRAIL の resistance swollen sores unseen fruit を sentaku に raised strong で き る possibility が expect さ れ る.