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蛋白質の折り畳みに基づいたHIV等の疾病に用いる電子工学的センサーの開発

基于蛋白质折叠开发针对艾滋病毒等疾病的电子传感器

基本信息

批准号：
07J01794
负责人：
鵜澤尊規
金额：
$ 4.61万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度の結果(J.Am.Chem.Soc.誌に投稿中)から、電極表面付近に分布する酸化還元ラベルの割合を抗体の添加に伴って変化させることで、抗体のセンサーが作製できることが示唆された。そこで、酸化還元ラベル化した17塩基の線状DNAを金電極に修飾し、その後にエピトープペプチドが修飾された相補DNAを混合しセンサーとした。2本鎖DNAの柔軟性とシグナル変化の相関が予想されたので、2本鎖DNAに様々な変異を入れた系を用意し、酸化還元ラベルと金電極間の電子移動速度および抗体添加時のファラデー電流の変化率を調べた。具体的には、完全な相補配列をもつPM、2本鎖DNAの中央に1つ変異を入れた1MM、2つ変異を入れた2MM、電極側の5つに変異を入れた5MM5'、酸化還元ラベル側に5つの変異を入れた5MM3'の計5種類の酸化還元ラベル化DNAを用意して用いた。予想通り、非常に剛直なPMと1MMおよび酸化還元ラベルの分布の変化が起きにくい5MM3'に比べて、柔軟な2MMと5MM5'は、抗体の添加前後に電子移動速度に大きな変化が観測された。HIV抗体添加時の電流の変化率は、2MMは103±10%(コントロール9±2%)、5MM5'は142±40%(コントロール2±1%)となり、HIV抗体センサーの作成に成功した。上で用いた方法が他の抗体に対しても適用可能かを、ステロイドの一種であるDigoxigeninを相補DNAに修飾して、先の酸化還元ラベル化DNA(5MM5')と2本鎖を形成させHIVセンサーとの交換反応を調べた。その結果、Digoxigeninラベル化相補DNAの系は、Digoxigenin抗体に反応し(260±77%)、HIV抗体には反応しなかった(4±2%)。逆に、エピトープペプチドラベル化相補DNAの系は、Digoxigenin抗体には反応せず(6±1%)、HIV抗体にのみ反応した(196±4%)。本研究で開発したセンサーはこのような汎用性の高さに加えて、数分以内に抗体の有無が確認でき、かつコスト的に有利となる高い再生能を持っていることから、今後の発展が期待されるセンサーであると考える。この結果の一部については2010年1月にGordon conferenceで発表し、全てのデータを含めた論文について現在投稿準備中である。

The results of the previous year (J.Am.Chem.Soc. In the contribution of the electrode, the surface of the electrode is distributed, acidified, the antibody is added, the antibody is added, and the antibody is used to show that it is instigated. After treatment, acidizing and acidizing, the base metal DNA is used to repair the electrical equipment, and after the operation, it is necessary to correct the phase, and mix the DNA with the metal. 2. This DNA flexible device makes it easier to change the frequency of the computer, and the other two books of the DNA to register the system's intention, acidify and reduce the speed of movement of the electrons between the thermostats. When the antibody is added, the frequency of the current is affected. The specific and complete data sets are as follows: PM, 2MM, 2MM, 2MM, 5MM5', acidizing, 5MM3', 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5MM3, 5 If you want to make sure that you want to PM the 1MM, you can acidify the distribution, you can start the 5MM3 'ratio, the 2MM5M5, the speed before and after the antibody is added, and the speed of moving the battery will be higher. When HIV antibody was added, 2MM was 103 ±10%, 2MM was 9 ±2%, 5mm 5 'was 142 ±40%, and HIV antibody was 2 ±1%. In the previous section, we used the method to determine whether the antibody could be used to correct the Digoxigenin phase, to modify the DNA, to acidify the DNA (5MM5'), and to form the HIV device. The results showed that the Digoxigenin antigens, Digoxigenin antibodies and HIV antibodies were negative (260,260 ±77% and 4 ±2%). The reverse phase, Digoxigenin antibody and HIV antibody were detected in reverse phase, Digoxigenin antibody and HIV antibody respectively. The purpose of this study is to increase the accuracy of sex testing, the confirmation of antibodies within a few points, and the beneficial effects of high-performance regeneration. in the future, the exhibition is looking forward to the future performance test. The results show that a copy of the Gordon conference report of January 2010, which contains a full list of documents, is now under preparation for submission.