ヘルペスウイルスの宿主特異性決定機構の解明

阐明疱疹病毒的宿主特异性决定机制

基本信息

批准号：
07J02124
负责人：
有井潤
金额：
$ 1.73万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J02124/
关键词：
ヘルペスウイルス gB PILR fusion endocytosis 宿主特異性 BAC レセプター

项目摘要

多くのアルファヘルペスウイルスはさまざまな細胞種に感染可能であるが、イヌヘルペスウイルス、ネコヘルペスウイルスはそれぞれイヌ由来細胞、ネコ由来細胞でしか増殖することができない。この厳密な宿主域を規定する原因を探索するため、最終的にはこれらのウイルスゲノムを自在に組換えられるシステムの確立をまず試みた。イヌヘルペスウイルスについてはすでに組換え系が確立しており、論文発表しているが、さらに本年度は、ネコヘルペスウイルスゲノムの大腸菌への保持と、組換えウイルスの作成系を確立した。(Microbiol Immunol.2009)アルファヘルペスウイルスが細胞に侵入するときに必須である糖タンパクはgD、gB、gH、gLの4種類である。これまでは唯一細胞側の受容体が同定されているgDを中心に研究がなされてきた。しかし我々のグループでは、共同研究者とともに、gBと結合する新しいHSV-1のレセプターとしてPILRαを同定した(Satoh T, Arii J and et.al.Cell 2008)。本研究課題において、ブタのアルファヘルペスウイルスであるオーエスキー病ウイルスがPILRαを用いることを明らかにした。一方HSV-1に極めて近縁なHSV-2はPILRαを用いることができず、新たにPILRαがHSV-1とHSV-2の病態の差に寄与している可能性が考えられた。また、ヘルペスウイルスは細胞膜表面でのfusionあるいはendocytosisを介して細胞に侵入する。二つのルートは完璧に細胞腫に依存しており、どのように選択されているかは不明であった。CHO細胞や、CHOにgD receptorを発現させた場合はHSv-1はendocytosisを介して侵入することが知られていた。しかし、新しく同定したPILRαを発現させたCHOへの侵入はfusionを介していた。すなわち、CHOへの侵入経路がPILRαの発現によって変化することが明らかとなり、二つの侵入経路を決定する因子の一つがgBのレセプターである可能性が示唆された。この結果は最も権威のあるウイルス学雑誌Journal of Virologyに採用され、editorが選ぶspotlightとして巻頭において紹介された。さらに、PILRαを用いることができない組換えウイルスを作製し、マウスへの感染実験に供することで、実際に生体内において、PILRαがヘルペスウイルスの増殖や病態に重要な役割を担っていることを初めて明らかにした。(投稿準備中)

许多α疱疹病毒可以感染各种细胞类型，但是犬疱疹病毒和猫疱疹病毒只能分别在犬和猫衍生的细胞中增殖。为了找到确切的宿主范围定义的原因，我们首先尝试建立一个可以自由重组这些病毒基因组的系统。已经为犬疱疹病毒建立了一个重组系统，并发表了一篇论文，但是今年我们已经建立了一个保留大肠杆菌中猫疱疹病毒基因组并创建重组病毒的系统。（MicrobiolImmunol。2009）对于Alpha-Hepes病毒侵袭细胞至关重要的四种类型的糖蛋白：GD，GB，GH和GL。到目前为止，已经在GD上进行了研究，该研究已经确定了唯一的细胞侧受体。但是，在我们的小组中，与合作者一起，我们将PILRα确定为与GB结合的新HSV-1的受体（Satoh T，Arii J和Et.Al. Cell 2008）。在这个研究主题中，据透露，Aueski病毒是一种PIG Alpha疱疹病毒，使用PILRα。另一方面，PILRα不能用于与HSV-1密切相关的HSV-2，并且认为PILRα可能有助于HSV-1和HSV-2之间的病理条件差异。此外，疱疹病毒通过融合或细胞膜表面的内吞作用进入细胞。这两条路线完全依赖于细胞瘤，目前尚不清楚如何选择它们。众所周知，当Cho细胞和CHO表达GD受体时，HSV-1通过内吞作用侵入。然而，通过融合，对CHO的侵袭是通过融合而表达的。换句话说，据揭示了PILRα的表达改变了进入CHO的侵袭途径，这表明确定两种侵袭途径的因素之一可能是GB的受体。这一结果被最负盛名的病毒学杂志采用，并在本书的开头是编辑的选择。此外，通过生成无法使用PILRα并将其用于小鼠感染实验的重组病毒，它首次揭示了PILRα实际上在体内疱疹病毒的增殖和病理中实际上起着重要作用。（准备后）