染色体安定化とDNA修復におけるヒストンH2AXリン酸化の生物学的機能の解析

组蛋白H2AX磷酸化在染色体稳定和DNA修复中的生物学功能分析

• 批准号: 07J08571
• 负责人: 市島 洋介
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J08571/
• 关键词: DNA損傷応答; 染色体安定性; H2AX; 四倍体; 分裂期; 染色体不安定性; DNA損傷チェックポイント; 腫瘍形成; 不死化

染色体を安定に保つことは発癌のリスクを下げるうえで非常に重要であり、ヒストンH2AXはDNA損傷応答に機能することで染色体安定化に寄与している。我々は初めに分裂期に着目し、DNA損傷チェックポイントの機能解析を行った。分裂期の細胞においてDNA損傷チェックポイントの活性化は、間期の細胞より非常に強く検出された。しかし、チェックポイントの強い活性化にも関わらず、分裂期の進行は停止せずに進行してしまうことが判った。さらに分裂期におけるDNA修復効率をリン酸化H2AX(γ-H2AX)の減少の度合いとコメットアッセイにより調べたところ、分裂期ではDNA修復がほとんど行われないことが明らかとなった。このような分裂期におけるDNA損傷応答の機能不全が腫瘍形成の原因になり得るのではないかと考え、分裂期のDNA損傷と染色体異常の発生について調べたところ、γ-H2AX陽性である分裂期の細胞は細胞分裂を失敗し四倍体の細胞になってしまうことが示唆された。MEFを不死化させる実験系を用いて、分裂期でのγ-H2AX、四倍体細胞産生、細胞の不死化の相関関係を調べてみたところ、驚いたことに不死化したばかりのMEFは四倍体になっていて、さらに分裂期でのγ-H2AXやMEFの不死化との相関が認められた。不死化したMEFの継代を繰り返していくことで、染色体の欠失が起きて、やがて細胞は四倍体から異数体になることが明らかとなった。DNA損傷応答、染色体安定性に関わる新規因子を同定するため、カナダSamuel Lunenfeld Research Institute,Dr.Daniel Durocher研究室において研究を行った。DNA損傷に応答し損傷部位でフォーカスを形成する新規因子を同定し、現在は詳細な分子メカニズムの解析を行っている。

Chromosome stability is important for cancer development and DNA damage response. The function analysis of DNA damage in the early stage of division The cells in the division phase are damaged by DNA damage, and the cells in the interphase are very strongly damaged. The activity of the active phase is related to the activity of the active phase, and the division phase is related to the activity of the active phase. DNA repair efficiency during mitotic phase is reduced by acidification of H2AX (γ-H2AX) and DNA repair during mitotic phase. DNA damage and dysfunction in mitotic phase cause tumor formation. DNA damage and chromosome abnormality in mitotic phase cause tumor formation. DNA damage and chromosome abnormality in mitotic phase cause tumor formation. The relationship between MEF inactivation and MEF inactivation is regulated by γ-H2AX in mitotic phase. MEF generation is not stable, chromosome loss is not stable, tetraploid is not stable, chromosome loss is stable. DNA damage response, chromosome stability, new regulation factor identification, Samuel Lunenfeld Research Institute, Dr. Daniel Durocher Laboratory DNA damage is the result of the identification of new factors in the formation of DNA damage sites, and the analysis of DNA damage sites in detail.

项目成果

DNA lesion-carry over into M phase leads to genomic instability

DNA 损伤转移至 M 期导致基因组不稳定

• 发表时间: 2008
• 作者: Seino K;Ishizaki S;Seino K;清野 絵;清野 絵;市島洋介
• 通讯作者: 市島洋介

分裂期におけるDNA損傷チェックポイントの機能不全と四倍体細胞産生との関連

有丝分裂过程中DNA损伤检查点功能障碍与四倍体细胞产生的关系

• 发表时间: 2007
• 作者: Seino K;Ishizaki S;Seino K;清野 絵;清野 絵;市島洋介;市島 洋介
• 通讯作者: 市島 洋介