遺伝子治療薬の生体内投与後の毒性発現機構解析

基因治疗药物体内给药后毒性表达机制分析

• 批准号: 07J13124
• 负责人: 山口 朋子
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J13124/
• 关键词: アデノウイルス; 自然免疫; VA-RNA; RIG-I; IPS-1; 線維芽細胞; MyD88; TLR9; 樹状細胞; マクロファージ

アデノウイルス(Ad)ベクターは既存のベクターの中では最も遺伝子導入効率に優れており、in vivoでの遺伝子導入も可能なことから、種々の疾患に対する遺伝子治療用ベクターとして使用されている。しかし、Adベクターを生体へ投与した場合、炎症性サイトカインやインターフェロン(IFN)の産生をはじめとする自然免疫応答が惹起されることが知られており、Adベクターの安全性向上のためには、Adベクターにより誘導される自然免疫応答のメカニズムを解明することが重要な課題と考えられている。そこで本年度は自然免疫応答を惹起するようなウイルス側因子の同定を試みた。ウイルス側責任因子としては、(1)ウイルスの殻であるカプシドタンパク質、(2)ウイルスゲノムDNA、(3)ウイルスの転写産物などが考えられる。昨年度の結果より、AdベクターによるIFNの産生にRNAが関与している可能性が示唆されていたこと、Adと同じくDNAウイルスであるEBウイルスがコードする小分子RNAであるEBERが自然免疫応答の受容体に認識されその後IFNの産生を惹起するとの報告があったことから、Adがコードする小分子RNAであるVA-RNAに着目した。VA-RNAがRNAポリメラーゼIIIにより転写されることから、まずRNAポリメラーゼIII阻害剤を用いて検討を行った。その結果、阻害剤の濃度依存的にAdベクターによるIFNの産生が低下していた。このことからRNAポリメラーゼIIIにより転写されるRNAがAdベクターによるIFNの産生に関与していることが示唆された。次に、VA-RNAの直接的関与について検討を行うため、野生型AdもしくはVA-RNA領域を欠損させたAdを用いた。その結果、骨髄細胞よりGM-CSFを用いて誘導を行った樹状細胞だけでなくマウス胎児線維芽細胞においてもVA-RNAによりIFNの産生が惹起されることがはじめて明らかとなった。

In addition, the gene introduction efficiency of the existing gene in vivo is improved, and the gene introduction efficiency of the existing gene in vivo is improved. In addition, the production of inflammatory cytokines (IFN) in vivo and in other situations is an important topic in the study of the safety of adducts. This year's natural immune response was triggered by the same factor. (1) the quality of the shell,(2) the DNA of the shell,(3) the product of the shell. Last year's results showed that the possibility of RNA production related to IFN production was related to small molecule RNA, EBER and natural immune response receptor recognition, and the possibility of IFN production related to small molecule RNA was related to small molecule RNA. VA-RNA RNA As a result, IFN production decreased due to the concentration-dependent effect of the inhibitor. This is the first time that we've seen this. Second, VA-RNA direct correlation and detection, wild-type Ad, VA-RNA domain deficiency, Ad As a result, bone marrow cells and GM-CSF were induced to produce IFN in dendritic cells.

项目成果

アデノウイルスベクターによる Toll-like receptor 非依存経路を介する自然免疫誘導について

腺病毒载体通过 Toll 样受体独立​​途径诱导先天免疫

• 发表时间: 2009
• 作者: Yhmaguchi T.;et. al.;下村幸子;山口朋子 など
• 通讯作者: 山口朋子 など

アデノウイルスベクターによるTol1-like receptor依存・非依存経路を介した自然免疫誘導について

腺病毒载体通过 Tol1 样受体依赖性和非依赖性途径诱导先天免疫

• 发表时间: 2007
• 作者: Kenji Kawabata;et al.;下村幸子;山口 朋子
• 通讯作者: 山口 朋子

Involvement of MyD88 and TLR9 in the innate immune response elicited by replication-incompetent adenovirus vectors

MyD88 和 TLR9 参与无复制腺病毒载体引发的先天免疫反应

• 发表时间: 2007
• 作者: Tomoko Yamaguchi.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Reduction of vector-induced innate immunity by SOCS1-expressing adenovirus vector

表达 SOCS1 的腺病毒载体降低载体诱导的先天免疫

• 发表时间: 2008
• 作者: Matsuya;Y;Imamura;Y;Miyahara;T;Ochiai;H.;Nemoto;H.;川端健二
• 通讯作者: 川端健二

Role of MyD88 and TLR9 in the Innate Immune Response Elicited by Serotype 5 Adenovirus Vectors

MyD88 和 TLR9 在血清型 5 腺病毒载体引发的先天免疫反应中的作用

• 发表时间: 2007
• 作者: Tomoko Yamaguchi.;et. al.
• 通讯作者: et. al.