マウス胚性幹細胞の神経細胞への分化誘導に関する研究

小鼠胚胎干细胞诱导分化为神经细胞的研究

基本信息

批准号：
07J53173
负责人：
北澤彩子
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Toyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マウス胚性幹細胞(ES)細胞から均一なES細胞コロニーを得ることを目的とし、浮遊培養により形成させたES細胞コロニーの未分化状態及びコロニー形成率を検討した結果、直径200μmのコロニーが多数形成され、且つ10日間培養しても未分化状態を維持していることが明らかになった。神経細胞への分化誘導効果を持つことを明らかにしている脊髄後根神経節(DRG)のconditioned medium(CM)を、直径200μmのコロニーに添加して培養し、分化した神経細胞の種類を同定した結果、分化した神経細胞は主に運動ニューロンであり、分化した神経細胞のうちの50%を占めることが明らかになった。この結果は、感覚ニューロンであるDRG神経細胞から分泌された可溶性物質により、そのターゲットニューロンである運動ニューロンにES細胞の分化誘導が促進されたことを示しており、本研究により初めてターゲット細胞へのES細胞の分化誘導を示唆したものである。限外ろ過フィルターを用いてDRG-CMを分画し、各分画液の神経細胞への分化誘導効果を検討した結果、分子量10,000以上の分画液にDRG-CMと同程度の分化誘導効果が得られた。しかし、5,000以下の分画液にも、無添加に比較して分化誘導効果があった。DRG-CM内には高分子物質の他に低分子物質の分化誘導因子が示唆され、現在誘導物質を特定する研究を行なっている。NGFで被覆した微小磁気ビーズと磁石を用いて、ES細胞から分化した神経細胞のみを磁石領域内に分離・固定する方法について検討した結果、磁石領域内に神経線維を伸長している多くの神経細胞が観察されたことから、特定の細胞を分離・固定する方法を開発することが出来き、今後、分離・固定した細胞を回収する研究を行う予定である。

目的是从小鼠胚胎干细胞（ES）细胞中获得均匀的ES细胞菌落，以及由悬浮培养物形成的ES细胞菌落的未分化状态和菌落形成速率表明，许多直径为200μM的菌落也被形成，并且即使经过10天的培养，它们仍保持未分化的状态。在直径为200μm的菌落中添加了对神经元具有差异化的诱导神经元的条件培养基（CM），其诱导神经元具有差异化作用，并培养了它们，并且鉴定了分化的神经元的类型，并且发现区分神经元的神经元主要是差异化的神经元，用于50％的神经元。该结果表明，从感觉神经元DRG神经元分泌的可溶性物质促进了ES细胞分化为靶神经元的运动神经元的分化，这项研究表明，首次将ES细胞分化诱导到靶细胞中。使用超滤滤波器将DRG-CM分离，并检查了将每个分级溶液分化为神经元分化的效果，结果，诱导分化与DRG-CM相同的效果，在分数溶液中使用10,000或更多的分子量中获得了分离溶液。但是，与添加溶液相比，低于5,000的分级溶液具有诱导的效果。除了聚合物质外，DRG-CM还提出了诱导小分子分化的因素，目前正在进行研究以识别诱导剂。我们研究了一种使用NGF涂层的微磁珠和磁体将与ES细胞区分为磁铁区域的神经细胞分离和固定的方法。结果，观察到许多在磁铁区域内延伸神经纤维的神经元，我们能够开发一种分离和固定特定细胞的方法，我们计划将来对恢复分离和固定细胞进行研究。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

脊髄後根神経節培養液の添加によりマウス胚性幹細胞から分化した神経細胞の種類の検討

添加脊髓背根神经节培养基检测小鼠胚胎干细胞分化的神经元类型

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takahashi;T.;Ikeda;K;Hasegawa;T;Yoshihiro Hasegawa;宮本琢也・前川佳一・矢寺顕行・加護野忠男;宮本琢也;宮本琢也;宮本琢也・前川佳一;Hiromi Sato;Hiromi Sato;松田和希;松田和希;北澤彩子
通讯作者：
北澤彩子

Characterization and isolation of neurons differentiated from mouse ES cells by DRG-conditioned medium

DRG 条件培养基从小鼠 ES 细胞分化而来的神经元的表征和分离

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takahashi;T.;Ikeda;K;Hasegawa;T;Yoshihiro Hasegawa;宮本琢也・前川佳一・矢寺顕行・加護野忠男;宮本琢也;宮本琢也;宮本琢也・前川佳一;Hiromi Sato;Hiromi Sato;松田和希;松田和希;北澤彩子;北澤彩子
通讯作者：
北澤彩子