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線虫の神経回路レベルで成立する嗅覚順応の分子メカニズム

秀丽隐杆线虫神经回路水平嗅觉适应的分子机制

基本信息

批准号：
18700319
负责人：
広津崇亮
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

線虫の神経回路レベルで成立する嗅覚順応において、Ras-MAPK経路とGLR-1グルタミン酸レセプターが介在神経で重要な働きをすることが、以前の研究によりわかってきた。さらにin vitroリン酸化実験により、MAPKがGLR-1の616番セリンを直接リン酸化することが示された。それらの結果を踏まえ、本年度はGLR-1グルタミン酸レセプターのリン酸化に焦点を当てて解析を行い、以下の成果を得ることができた。1. 616番セリンをアラニンに置換したGLR-1を介在神経に発現させても、glr-1変異体の順応異常が回復しなかったことから、この部位のリン酸化が順応に必要であることがわかった。2. 616番セリンのリン酸化を認識する、抗リン酸化型GLR-1抗体を作製した。3. 免疫組織染色実験を行い、順応が成立する条件の匂い刺激を与えたときに、介在神経においてリン酸化GLR-1の染色が観察されることを見出した。また、生体内でRasの活性化をライブイメージングできる蛍光分子Raichu-Rasの、線虫神経系への導入を行った。まず、匂い刺激に応答してRasが活性化することがわかっている嗅覚神経AWCにRaichu-Rasを発現させた株を確立した。匂い刺激を与えてRaichu-Rasの蛍光変化を観察したところ、匂い刺激から数秒後にRasが活性化し、さらに数秒後に不活性化することがわかった。これらの結果は、Rasの活性化を生体内で観察した初の報告である。また、嗅覚神経AWCでは匂い刺激をなくしたときにカルシウムイオン濃度が上昇することが報告されている(Sreekanth et al,. Nature, 450, 63-70, 2007)。このことから、カルシウムイオン濃度の低下に伴ってRasが活性化する可能性が示唆された。

The bug circuit is set up to sniff the GLR-1 circuit, Ras-MAPK the road, the acid circuit, the important one, the previous research. Direct acidizing, acidizing, acidizing The results show that the focus of this year's GLR-1 analysis has been improved, and the following results have been obtained. 1. Six hundred and sixteen times in the first place, the GLR-1 was placed in the center of the body, and the glr-1 body was often returned to the body. The parts were acidified. 2. 616 times, the acidified GLR-1 antibodies were used as antigens, and the acidified antigens were used as antigens. 3. Immuno-tissue staining was used to establish conditional stimulation and GLR-1 staining, which was used to detect the presence of acid. In vivo, the Ras is activated, the light molecule Raichu-Ras is activated, and the insect god system is activated. In response to Ras activation, you can smell the god, AWC, Raichu-Ras, and make sure the plant is standing. Ras was activated after several seconds of stimulation and inactivation of Ras after several seconds of stimulation and inactivation after several seconds. The results of this study, the results of Ras activation, and the results of the preliminary report in vivo were reviewed. AWC, smell, listen, smell, smell, Nature, 450,63-70, 2007). The possibility of Ras activation indicates that there is a low degree of activity.