自己受容体とSNARE蛋白質群との直接相互作用による開口放出抑制機構の解明

通过自身受体和 SNARE 蛋白之间的直接相互作用阐明胞吐抑制机制

• 批准号: 18700356
• 负责人: 倉増 敦朗
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18700356/
• 关键词: ヒスタミンH3受容体; ヘリックス8; G蛋白質共役型受容体; アロステリックリガンド; リピッドラフト; CLIC4; G蛋白質共役受容体; カルボキシ末端; 自己受容体; SNARE蛋白質

1.ヒスタミンH3受容体カルボキシ末端のシグナリングにおける役割いくつかの構造予測プログラムによる解析の結果、ヒスタミンH3受容体カルボキシ末端の近位側にヘリックス8と呼ばれるαヘリックス構造の存在が示唆された。このヘリックス構造は、ロドプシンなど他のG蛋白質共役型受容体のヘリックス8と同様に、両親媒性の特徴を持っていた。ヒスタミンH3受容体のヘリックス8内のアミノ酸をアラニンに置換した変異受容体を用いて、種々の受容体機能を解析した。変異型受容体の全発現量および細胞表面発現量は、野生型H3受容体と比べて大きな差を認めなかったが、疎水性のアミノ酸(Phe419, Phe423, Leu426, Leu427)の変異体において、Gi蛋白質を介したシグナリングおよびG蛋白質活性化能が減弱していた。この結果から、ヒスタミンH3受容体のヘリックス8は受容体とG蛋白質の共役に重要であることが示唆された。H3受容体カルボキシ末端の分子モデリングの結果、これらの疎水性アミノ酸は細胞膜側を向いていることから、この部分がヘリックス8を細胞膜に固定する役割があることが推測される。この結果は、ヒスタミンH3受容体のへリックス8がアロステリックリガンドの標的になりうることを示す。2.ヒスタミンH3受容体及び受容体カルボキシ末端結合蛋白質のリピッドラフト局在抗H3受容体抗体によりラット脳ホモジネート中にH3受容体の単量体と二量体を同定した。スクロース密度勾配分画により、種々のH3受容体カルボキシ末端結合蛋白質(シンタキシン、SNAP25、VAMP、CaMキナーゼ、Munc18、シナプトタグミン)及びH3受容体のリピッドラフト局在を調べたところ、H3受容体の単量体は、G蛋白質αサブユニット、カルシウムチャンネルαサブユニット、シンタキシン、SNAP25、VAMPと共にリピッドラフトに局在しているのに対して、H3受容体の二量体はラフト以外に局在していることが明らかとなった。このことは、H3受容体の単量体が機能的に重要であることを示唆する。

1。来自几个结构预测程序的组胺H3受体羧末端分析的作用，表明存在一种α-螺旋结构，称为Helix 8近端是组胺H3受体羧基末端。这种螺旋结构，例如其他G蛋白偶联受体（如视紫红质）的螺旋8具有两亲性特征。使用突变受体分析了各种受体功能，其中组胺H3受体的螺旋8中的氨基酸被丙氨酸取代。尽管与野生型H3受体相比，突变受体的总表达水平和细胞表面表达水平没有显着差异，但在疏水氨基酸突变体中激活胃肠道蛋白的能力（PHE419，PHE423，LEU426，LEU427，LEU427）在激活GI蛋白的能力中减弱。这些结果表明，组胺H3受体的螺旋8对于受体和G蛋白的结合很重要。由于H3受体的羧基末端的分子模型，这些疏水性氨基酸朝向细胞膜，因此可以推断出该部分在将螺旋8固定到细胞膜中具有作用。该结果表明组胺H3受体的螺旋8可以成为变构配体的靶标。 2。组胺H3受体和受体羧基末端结合蛋白的脂质定位揭示了大鼠脑匀浆中H3受体的单体和二聚体。蔗糖密度梯度分级研究研究了各种H3受体羧基末端结合蛋白（Syntaxin，Snap25，VAMP，VAMP，CAM激酶，MUNC18，MUNC18，Synaptotagmin）和H3受体的脂质筏定位​​，表明H3受体与H3受体的单体均与LIP rip ryatioum contious crountious crountious crountious crountious。亚基，语法，snap25和vamp，而H3受体的二聚体则位于筏以外的其他地方。这表明H3受体的单体在功能上很重要。

项目成果

ヒスタミンH3受容体カルボキシ末端の機能

组胺H3受体羧基末端的功能

• 发表时间: 2007
• 作者: 倉増敦朗;他
• 通讯作者: 他

Recent advances of molecular pharmacology on histamine system : Roles of C-terminal tails of histamine receptors

组胺系统分子药理学最新进展：组胺受体C末端尾部的作用

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Pharmacological Sciences 101・1
• 作者: Takashima;M.;Dai H;Kuramasu A
• 通讯作者: Kuramasu A

The carboxy-terminal tail of histamine H3 receptor is necessary for Gi-mediated signaling.

组胺 H3 受体的羧基末端尾部对于 Gi 介导的信号传导是必需的。

• 发表时间: 2007
• 作者: Atsuo Kuramasu;et. al.
• 通讯作者: et. al.