Rolle der Acetylase-Aktivität des transkriptionellen Ko-Regulators p300 in der Differenzierung

转录辅助调节因子 p300 的乙酰化酶活性在分化中的作用

• 批准号: 5358498
• 负责人: Privatdozent Dr. Werner Lutz
• 金额: --
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5358498?language=en
• 关键词: Rolle; der; Acetylase; Aktivit; des

p300 ist ein Ko-Regulator einer großen Zahl von Transkriptionsfaktoren mit multiplen Funktionen in verschiedenen zellulären Prozessen. Wir haben durch homologe Rekombination in embryonalen Stammzellen Mäuse mit einer Punktmutation im p300 hergestellt (p300ASneo). Dieses Knock-in Allel kodiert für ein vollständiges p300 Protein, das im Gegensatz zum Wildtyp-Protein keine nachweisbare Protein-Acetylase-Aktivität aufweist. Die Expression des mutierten Allels wird vollständig unterdrückt solange das als Selektionsmarker verwendete neo Gen in einem Intron des p300 vorliegt. Das Allel wird dereprimiert wenn das von loxP-Sequenzen flankierte neo durch die Cre-Rekombinase aus dem p300-Lokus entfernt wird. Die Untersuchung von Mäusen, die heterozygot für das dereprimierte p300ASlox sind, hat gezeigt, dass das acetylase-defiziente p300-Protein eine dominant negative Wirkung ausübt. Diese Eigenschaften erlauben es, p300ASneo analog einem klassischen konditionellen Allel zu verwenden: p300ASneo Mäuse werden mit Mäusen gekreuzt, die die Cre-Rekombinase gewebsspezifisch exprimieren. Durch die Depression Allels ausschließlich im cre-exprimierenden Gewebe kommt es zur gewebsspezifischen Expression des dominant negativen p300 Proteins, das in der Folge selektiv diejenigen Prozesse blockiert, für die Acetylase-Aktivität des p 300 notwendig ist. Mit diesem konditionellen, dominant negativen Allel soll untersucht werden, welche Rolle die enzymatisch Aktivität des p300 im Verlauf der Differenzierung spielt. Dazu wollen wir im Hämatopoese und Adipogenese zwei auf molekularer Ebene gut beschrieben Differenzierungsvorgänge betrachten.

p300是一个大型稳压器，用于在不同的过程中具有多种功能的传输。我们在胚胎Stammzellen Mäuse中进行同源重组，在p300 hergestellt（p300 ASneo）中进行了一次突变。Dieses Knock-in Allel kodiert für ein vollständiges p300 Protein，das im Gegenetrum Wildtyp-Protein keine nachweisbare Protein-Acetylase-Aktivität aufweist.多等位基因的表达将在p300前的一个内含子中找到新基因的选择标记。当从p300-Lokus进入Cre-Rekombinase时，loxP-测序的新侧翼将被删除。通过对Mäusen的研究，发现p300 ASlox的异源性，乙酰化酶缺乏的p300蛋白也是一种显性负性蛋白。这一特征是，p300 ASneo类似物是一种经典的条件，可以用来测试：p300 ASneo Mäuse韦尔登与Mäusen进行了测试，Cre-Rekombinase进行了测试。抑郁症等位基因在临床表现中可能会导致显性负性p300蛋白的表达，这在Folge selektiv diejenigen Prozesse blockiert中是不必要的，因为p300的乙酰化酶激活。尽管这种情况下，显性负性的Alrel soll untersucht韦尔登，以及Rolle die enzymatisch Aktivität des p300 im Verlauf der Differenzierung spielt。大足希望我们在母乳和脂肪中有两种不同的分子差异。