Rolle der Acetylase-Aktivität des transkriptionellen Ko-Regulators p300 in der Differenzierung

P300是在Ko-调节器einer groçen Zahl von Transkritions s faktoren MIT乘以Verschiedenen zellulären Prozessen的Funktionen。我们在胚胎中进行同源重组Stammzellen Mäuse MIT einer Punktting in p300 Hersterellt(P300ASneo)。P300蛋白，das im Gegensatz zum Wildtyp-Protein keine nachweisare Protein-Acetylase-Aktiität aufweist。在Einem Intron des P300 Volliegt中，表达式des mutierten allels wird vollständig unterdrück t Solange das ALS Selektions标记verwendete neo Gen。所有这些都将被取消，因为这是一项新的任务。P300ASlox Sind，Hat gezeigt，das Acetylase-Defiziente P300-Protein Eine显性阴性Wirkung Ausübt。例如：P300ASneo Mäuse Well den Mit Mäusen gekreuzt，die CRE-Rekombinase gewebsSpezifisch exprieren.持续的抑郁Allels auschlieülich im cre-exprierenden Gewebe kommt es zur gewesSpezifischen表达的是显性的阴性p300蛋白，das in der Folge selektiv diejenigen Prozesse Blockiert，für die actiylase-Aktiität des p300 notwendiist.麻省理工学院的条件是，占主导地位的是唯一的负数，而不同的是，它们的价值不同。大足人不同于其他人，他们的生活方式也不同。

p300 ist ein Ko-Regulator einer großen Zahl von Transkriptionsfaktoren mit multiplen Funktionen in verschiedenen zellulären Prozessen. Wir haben durch homologe Rekombination in embryonalen Stammzellen Mäuse mit einer Punktmutation im p300 hergestellt (p300ASneo). Dieses Knock-in Allel kodiert für ein vollständiges p300 Protein, das im Gegensatz zum Wildtyp-Protein keine nachweisbare Protein-Acetylase-Aktivität aufweist. Die Expression des mutierten Allels wird vollständig unterdrückt solange das als Selektionsmarker verwendete neo Gen in einem Intron des p300 vorliegt. Das Allel wird dereprimiert wenn das von loxP-Sequenzen flankierte neo durch die Cre-Rekombinase aus dem p300-Lokus entfernt wird. Die Untersuchung von Mäusen, die heterozygot für das dereprimierte p300ASlox sind, hat gezeigt, dass das acetylase-defiziente p300-Protein eine dominant negative Wirkung ausübt. Diese Eigenschaften erlauben es, p300ASneo analog einem klassischen konditionellen Allel zu verwenden: p300ASneo Mäuse werden mit Mäusen gekreuzt, die die Cre-Rekombinase gewebsspezifisch exprimieren. Durch die Depression Allels ausschließlich im cre-exprimierenden Gewebe kommt es zur gewebsspezifischen Expression des dominant negativen p300 Proteins, das in der Folge selektiv diejenigen Prozesse blockiert, für die Acetylase-Aktivität des p 300 notwendig ist. Mit diesem konditionellen, dominant negativen Allel soll untersucht werden, welche Rolle die enzymatisch Aktivität des p300 im Verlauf der Differenzierung spielt. Dazu wollen wir im Hämatopoese und Adipogenese zwei auf molekularer Ebene gut beschrieben Differenzierungsvorgänge betrachten.