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オプチニューリン遺伝子発現調節と緑内障発症における機能的役割の解析

optineurin基因表达调控及其在青光眼发生发展中的功能作用分析

基本信息

批准号：
18890164
负责人：
池田陽子
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

OPTN遺伝子上流のプロモーター領域配列をサブクローニングして、レポーター遺伝子解析をHepG2細胞を用いて施行した。この際LPS刺激を加えて転写活性の誘導を図ったが、明らかな転写活性の上昇は認められなかった。ヒト由来マクロファージ・培養肥満細胞に対してLPS刺激を加え、実際のOPTN発現をリアルタイムPCR法にて定量したところ、定常的なOPTN発現を認め、LPS刺激によらずとも十分量のOPTNが炎症細胞において恒常的に産生されていることが明らかとなった。免疫組織染色により、ヒト線維柱帯組織を染色したところ、びまん性にOPTNタンパクの沈着が認められ、また、マスト細胞の浸潤部位に一致して、強いOPTN陽性染色を認めた。ぶどう膜炎に続発する緑内障では多くの症例では、多くの症例で炎症細胞の組織浸潤がみられ、OPTN遺伝子の発現上昇が予想されたため、続発緑内障の水晶体前嚢および虹彩組織の臨床サンプルを採取してリアルタイムPCR法でOPTN発現を定量し、非炎症眼のそれと比較したところ、炎症眼では優位なOPTN発現の上昇を認めた。しかし、もともとの眼組織での恒常的OPTN発現が高く、OPTNの病態生理への意義を明確に明らかにするまでにはいたっていない。また当初、OPTNタンパクは可溶型のタンパクであると考えられており、各種の実験系を構築して解析を施行したが、実際には眼内においてはOPTNは可溶型タンパクというよりは構造タンパクであり、線維柱帯マトリクス形成能に果たす役割など新たな研究展開の必要性が示唆された。

OPTN's upstream and downstream fields are arranged and analyzed, and the OPTN's remaining vines are analyzed and implemented in HepG2 cells.この记LPS stimulates をadds えて転activation and induces を図ったが, and 明らかな転activation のrises and recognizes められなかった. The origin of ヒトマクロファージ・Cultivation of fat cells に対してLPS stimulation をaddえ,実记のOPTN発成をリアルタイムPCR method にてquantitativeしたところ、determination The normal appearance of OPTN is recognized, and LPS stimulates a tenth amount of OPTN and inflammatory cells, and the constant production of OPTN is constant. Immune tissue staining The infiltration site of the calm and stable cells was consistent and strong, and the positive staining of OPTN was consistent. Chronic inflammation, green cataract, multiple symptoms, tissue infiltration of inflammatory cellsがみられ, OPTN 伝子の発 appear to rise が yu imagining されたため, 続発green cataract のcrystal front 嚢および Iridescent tissue clinical examination using PCR method OPTN を quantitative analysis , Non-inflammation eyes are compared, and inflammatory eyes are superior, OPTN is present and rising, and recognition is done.しかし、もともとのocular organization でのconstant OPTN 発 appear が高く、OPTN The meaning of のpathological physiology is clear and clear. The original OPTN soluble typeり, Various types of の実験system をConstruction してAnalysis をExecution したが、実记にはeyes においてはOPTN soluble type タンパクというよりは structure タンパクであり, linear dimension column マThe necessity of research and development of the new research and development of Torikusu is the necessity of the new research.