口腔扁平上皮癌細胞の増殖、転移におけるSNIP1の役割

SNIP1在口腔鳞状细胞癌细胞增殖和转移中的作用

• 批准号: 18890182
• 负责人: 藤井 万紀子
• 金额: $ 1.65万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute (2007)Jichi Medical University (2006)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18890182/
• 关键词: c-Myc; SNIP1; 腫瘍増殖; 口腔扁平上皮癌; c-Myo; レンチウィルス; 細胞増殖; 腫瘍

I)SNIP1はp300と結合しc-Mycと複合体を成形してそれぞれを安定化させる事によって標的遺伝子の転写を促進する。一方、p15INK、P21などのSmadにより転写が促進されるTGF-βの標的遺伝子は、c-Mycによって転写を抑制される。SNIP1がc-Mycによる転写促進を増強するのみか、またc-Mycにより遺伝子抑制にも働くかを調べた。P15INK,P21遺伝子の抑制に関しては、SNIP1により影響は認められなかった。つまり、SNIP1はあくまでも、E-box依存的なc-Mycの転写活性増幅にのみ関与すると考えられた。II)口腔偏平上皮癌由来樹立細胞株を用いて、その足場非依存的増殖に対するSNIP1の影響を調べることや、癌転移のモデルとしてマウスの皮下または尾静脈へのSNIP1過剰発現細胞の注入を行い、病理組織学および生化学的手法を用いて解析を行うことを目的に実験を行ってきた。ここで問題になったのが、口腔偏平上皮癌細胞への遺伝子導入効率であった。ネオマイシンによる選択マーカーのあるプラスミドをCa922細胞に導入し、過剰発現する細胞を拾ったが、十分なタンパク発現を持つものは得られなかった。アデノウィルスを用した場合充分な発現量は認められたが、Ca922細胞の増殖速度は非常に高く、効果の持続期間が3-4日のみとなり、約3週間かかる実験系には不適であった。これらの結果を踏まえ、より持続的、効果的に発現できるレンチウィルスベクターシステムを導入した。SNIP1-N末端、C末端、全長のコンストラクト、更にSNIP1をノックダウンするレンチウィルスの構築が終了し、タンパクレベルでの効果の確認が終了した。更に足場非依存的細胞増殖実験やマウスへの細胞移植を行い、SNIP1の効果を調べていく予定である。

I) SNIP1 p300 binding and c-Myc complex formation, stabilization and target gene development A side, p15INK, P21 and Smad gene expression promote TGF-β and c-Myc gene expression inhibit TGF-β gene expression. SNIP1 c-Myc-induced enhancement, c-Myc-induced suppression P15INK,P21 gene inhibition related to SNIP1 gene inhibition. SNIP1 is not available. E-box dependent c-Myc is not available. II) Cell lines derived from squamous cell carcinoma of the oral cavity are used to modulate the effects of SNIP1 on growth and metastasis of squamous cell carcinoma. Subcutaneous injection of SNIP1 cells into the tail vein is performed. Pathological and biochemical methods are used to analyze the effects of SNIP1 on growth and metastasis of squamous cell carcinoma. The introduction rate of gene into oral squamous cell carcinoma cells is very high. The cells were introduced into Ca922 cells, and the cells were recovered. The growth rate of Ca922 cells is very high, and the duration of the fruit is 3-4 days. The result of this is that we have to find the right solution to the problem. SNIP1-N-terminal, C-terminal, full-length, and SNIP1-N-terminal, C-terminal, full-length, and SNIP1-N-terminal In addition, the effect of SNIP1 on the growth of field-independent cells can be determined.

项目成果

SNIP1 is a candidate modifier of the transcriptional activity of c-Myc on E box-dependent target genes

• DOI: 10.1016/j.molcel.2006.11.006
• 发表时间: 2006-12-08
• 期刊: MOLECULAR CELL
• 影响因子: 16
• 作者: Fujii, Makiko;Lyakh, Lyudmila A.;Roberts, Anita B.
• 通讯作者: Roberts, Anita B.

SNIP1(Smad Nuclear Interacting Protein 1)によるc-Myc転写活性の増強

SNIP1（Smad 核相互作用蛋白 1）增强 c-Myc 转录活性

• 发表时间: 2007
• 作者: Shunrou Fujiwara;Makoto Sasaki;Yoshiyuki Kanbara;Yutaka Matsumura;EriSlubata;Takeshi Inoue;Hideaki Nishimoto;Akira Ogawa;坂口 昌徳;岡野 栄之;Makiko Fujii et al.;藤井万紀子
• 通讯作者: 藤井万紀子