チロシンキナーゼTxkによるマスト細胞のTh1/Th2応答の制御機構

酪氨酸激酶Txk对肥大细胞Th1/Th2反应的控制机制

• 批准号: 18890236
• 负责人: 大野 建州
• 金额: $ 1.69万
• 依托单位: National Research Institute for Child Health and Development (2007)The Institute of Physical and Chemical Research (2006)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18890236/
• 关键词: アレルギー、喘息; 免疫学; マイクロアレイ; シグナル伝達; 細胞、組織; マスト細胞; Txk; TLR4; IL-12p40

マウス骨髄細胞由来培養マスト細胞(BMCMC)ヘレトロウィルスベクターを用いてTxkを強制発現し、コントロールのBMCMCsと比較して、LPSを用いたTLR4刺激時のサイト力イン産生プロファイルの検討を行った。RT-PCRを用いたmRNAレベルの発現解析、およびELISA法を用いたタンパク質レベルの発現解析を行った結果、Txkの強制発現によってTh1サイトカインであるIL-12p40のmRNA発現およびタンパク質レベルの産生が抑制され、さらにTh2サイトカインであるIL-13のmRNA発現およびタンパク質レベルの発現が増強されることが確認できた。次にTxkノックアウトマウスと野生型マウス骨髄細胞由来培養マスト細胞を比較してLPSを用いたTLR4刺激時のサイトカイン変生プロファイルの検討を行った。Txk強制発現による解析結果から、Txkノックアウトマウス由来BMCMCsでは野生型と比較して、LPs刺激によるIL-12p40発現の増加およびIL-13発現が抑制されることを予測したが、これらサイトカインのmRNA発現およびタンパク質レベルにおける発現、またこの他のサイトカインの発現に差は認められなかった。これらの結果から、マスト細胞のTLR4シグナル下流において、Txkはシグナル分子として機能しているが、Txkが欠損していてもそれを補うことのできるTxkと同じ機能を持つ分子が存在する可能性があると考えられた。

マ ウ ス bone marrow cell origin culture マ ス ト cells (BMCMC) ヘ レ ト ロ ウ ィ ル ス ベ ク タ ー を with い て Txk を forced 発 し now, コ ン ト ロ ー ル の BMCMCs と compare し て, LPS を with い た TLR4 stimulation の サ イ ト force イ ン produce プ ロ フ ァ イ ル の 検 line for を っ た. Rt-pcr を with い た mRNA レ ベ ル の 発 parsing, now お よ び を ELISA method with い た タ ン パ ク qualitative レ ベ ル の 発 now line analytical を っ た results, Txk の forced 発 now に よ っ て Th1 サ イ ト カ イ ン で あ る IL - 12 p40 の mRNA 発 now お よ び タ ン パ ク qualitative レ ベ ル の が an adverse さ れ, さ ら に Th 2 サ イ ト カ イ ン で あ る IL - 13 の mRNA 発 now お よ び タ ン パ ク qualitative レ ベ ル の 発 が now raised strong さ れ る こ と が confirm で き た. Time に Txk ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス と wild-type マ ウ ス bone marrow cell origin culture マ ス ト cells を compare し て LPS を with い た TLR4 stimulation の サ イ ト カ イ ン - born プ ロ フ ァ イ ル の 検 line for を っ た. Txk forced 発 now に よ る analytical results か ら, Txk ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス origin BMCMCs で は wild-type と compare し て, LPs stimulation に よ る IL - 12 p40 発 now の raised お よ び IL - 13 発 now が inhibit さ れ る こ と を be し た が, こ れ ら サ イ ト カ イ ン の mRNA 発 now お よ び タ ン パ ク qualitative レ ベ Youdaoplaceholder0 における occurs, また トカ <s:1> he <s:1> サ トカ トカ <s:1> <s:1> occurs に difference められな recognition められな トカ った. こ れ ら の results か ら, マ ス ト cells の TLR4 シ グ ナ ル obscene に お い て, Txk は シ グ ナ ル molecular と し て function し て い る が, Txk が owe loss し て い て も そ れ を fill う こ と の で き る Txk と つ molecular が existence with じ function を す る possibility が あ る と exam え ら れ た.