Development of novel probes for single-molecule imaging of proteihs

蛋白质单分子成像新型探针的开发

• 批准号: 19350084
• 负责人: YAMAMOTO Yukio
• 金额: $ 12.65万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19350084/
• 关键词: 生体認識・機能化学; センサー; 希土類蛍光ラベル剤; エネルギー移動; タンパク質; 特異的認識; 時間分解蛍光; 一分子計測; ペプチドタグ; トロポニンC; ジアステレオマー; 蛍光偏光測定; 二官能基性; 希土類

本研究課題では筋収縮弛緩機構の解明を目指し、トロポニンCの-分子計測を可能とする新規なプローブ分子の開発を進めてきた.まず、二官能性蛍光ラペル剤の開発については、二官能基型蛍光ラベル剤BRhoおよびBrosを設計・合成した. HPLCや1H-HMRの解析からBRhoではカルボキシ基の向きにより水素結合様式が変化するため、物性の異なる2つのラベル化タンパク質が生成することがわかった.一方、Brosではタンパク質結合後に一様なコンフォメーションをとることがわかり、蛍光ラベル化剤としてより優れた性質を有することがわかった.次に、タンパク質希土類蛍光ラベル剤の開発を行った.まず、非天然のアミノ酸配列(ペプチドタグ)を特異的に認識する希土類錯体を合成した.本錯体は亜鉛イオンを介してポリアスパラギン酸と錯形成し、ペプチドタグ中のトリプトファン側鎖から希土類中心へのエネルギー移動が効率よく進行することで、希土類の発光が遅延蛍光成分として観測されることがわかった.

This research topic is to clarify the mechanism of muscle contraction and to develop new molecular methods for molecular measurement Design, synthesis and development of novel, bifunctional fluorescent compounds. HPLC analysis of 1H-HMR: BRho: 1H-HMR: 1HMR: 1H-HMR: 1HMR: 1H A party, Bros, and a group of people who have the right to choose from. The development of the new type of light source will be carried out in the second place. The synthesis of rare earth-like compounds is based on the specific understanding of natural and unnatural acid sequences. The present invention relates to a method for detecting the emission of light from rare earths, which comprises the following steps: forming a light source, selecting a light source, and detecting a light component.

项目成果

Synthesis of a new bifunctionalised fluorescent label and physical properties of the bound form on model peptide of troponin

新型双功能荧光标记的合成及其在肌钙蛋白模型肽上结合形式的物理性质

• 发表时间: 2007
• 期刊: C, Organic & Biomolecular Chemistry 5
• 作者: Tasuku Hirayama;Syohei Iyoshi;Masayasu Taki;Yuichiro Maeda;Yukio Yamamoto
• 通讯作者: Yukio Yamamoto

Synthesis of a new bifunctionalised fluorescent label and physical properties of the bound form on model

新型双功能荧光标记的合成以及模型上结合形式的物理性质

• 发表时间: 2007
• 期刊: Organic & Biomolecular Chemistry 5
• 作者: T. Hirayama;S. Iyoshi;M. Taki;Y. Maeda;Y. Yamamoto
• 通讯作者: Y. Yamamoto

ピリジン環含有環状ニッケル錯体と外部配位子との結合挙動

含吡啶环的环状镍配合物与外部配体的键合行为

• 发表时间: 2009
• 作者: T. Hirayama;S. Iyoshi;M. Taki;Y. Maeda;Y. Yamamoto;吉田彰宏;旭史悦・多喜正泰・山本行男
• 通讯作者: 旭史悦・多喜正泰・山本行男

アミノクマリンを骨格とした新規レシオ型カドミウム蛍光プローブの開発

新型氨基香豆素骨架比率型镉荧光探针的研制

• 发表时间: 2007
• 作者: 〓suku Hirayama;Masayasu Taki;Yukio Yamamoto;多喜正泰・出崎美佳・山本行男
• 通讯作者: 多喜正泰・出崎美佳・山本行男

エチレングリコール担持金クラスターを用いた水銀の特異的検出とその反応メカニズム

乙二醇负载金簇特异性检测汞及其反应机理

• 发表时间: 2007
• 作者: 〓suku Hirayama;Masayasu Taki;Yukio Yamamoto;多喜正泰・出崎美佳・山本行男;平山祐・多喜正泰・山本行男;平山祐・多喜正泰・山本行男
• 通讯作者: 平山祐・多喜正泰・山本行男