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17型コラーゲンの表皮細胞における機能の解析

17型胶原蛋白在表皮细胞中的功能分析

基本信息

批准号：
19591292
负责人：
喬洪江
金额：
$ 3万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19591292/
关键词：
17型コラーゲン走化性 MAPK 14-3-3シグマ

项目摘要

XVII型コラーゲンは、基底膜の接着分子のひとつである。XVII型コラーゲンに対する自己抗体は全身に水疱を生じる、最も頻度の高い自己免疫性水疱症である水疱性類天疱瘡(BP)を発症する。XVII型コラーゲンは、N末端部が細胞内接着板に、C末端部が細胞外の透明層に存在している。XVII型コラーゲンはactinin1,4(アクチン結合蛋白質)、BPAG1、laminin5/6/10/11(細胞接着分子)と結合するとされているが。それ以外のproteinとは、いままだ報告はない。我々は、低分子干渉RNA法(siRNA)によるHaCaT細胞をXVII型コラーゲンをノックダウンし、細胞の走化性、接着性などシグナルを研究した。COL17ノックダウンした細胞を無血清培地で8時間培養後、XVII型コラーゲンノックダウンした細胞と陰性対照において、接着性は無変化だが、IV型コラーゲンとBD matrigel(IV型コラーゲンとラミニン含有)コーティングしたディッシュでは、XVII型コラーゲンノックダウンした細胞が陰性対照に対して明らかに低下していた(P<0.01)。MEK1/2とMAPK活性を調べたところ、低下していることが分かった。さらに、XVII型コラーゲンノックダウンした細胞は、細胞の走化性がp38MAPKに依存していることを解明した(p38MAPK inhibitor SB203580)。但し、細胞の接着性は、p38MAPKと関係していなかった。c-fosとc-junを調べたところ、無血清培地で8時間培養後、XVII型コラーゲンノックダウンした細胞において、発現が低下している。この現象は、XVII型コラーゲンと結合している14-3-3シグマは、細胞外に分泌したのが少なかったことと関わっていた。これら結果によって、ケラチノサイトにおいて、IV型コラーゲンは、V型コラーゲンと関わって、細胞の接着性を影響し、また、p38MAPKに依存し、細胞の走化性をに関連していることを見いだした。

Type XVII: The adhesion molecule of basement membrane Type XVII antibodies are associated with systemic blistering, most frequently with blistering pemphigoid (BP). Type XVII: The N-terminal part is an intracellular adhesion plate, and the C-terminal part is an extracellular transparent layer. Type XVII protein binding to actinin1,4(actin-binding protein), BPAG1, laminin5/6/10/11(cell adhesion molecule) Other than the protein, the report is not available. We are studying the characteristics of HaCaT cells by using low molecular RNA (siRNA). COL17 cells were cultured in serum-free medium for 8 hours, and type XVII cells were cultured in negative control medium, adhesion was not changed, type IV cells were cultured in BD matrigel, and type XVII cells were cultured in negative control medium (P<0.01). MEK1/2 MAPK activity is regulated and decreased. The dependence of p38 MAPK inhibitor on p38 MAPK inhibitor SB203580 was clarified. However, cell adhesion and p38MAPK are closely related. c-fos and c-jun are regulated in vitro, and serum-free culture is used for 8 hours. After culture, XVII type cells are cultured in vitro, and their appearance is low. This phenomenon is called XVII type. It is called 14-3-3. It is called extracellular secretion. The results show that p38 MAPK is dependent on p38 MAPK, and p38MAPK is dependent on p38MAPK.