权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Establishment of cardiac pacemaker cells differentiated from mouse ES cells and Development of new transplantation therapy with artificial pacemaker cells.

小鼠ES细胞分化的心脏起搏细胞的建立以及人工起搏细胞新移植疗法的开发。

基本信息

批准号：
19591617
负责人：
YANAGI Kentoku
金额：
$ 2.83万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19591617/
关键词：
心臓大血管外科学ペースメーカー再生医学

项目摘要

マウスES細胞よりペースメーカー細胞を単独に分化誘導し、洞不全症候群に対する細胞移植治療の糸口を見出すことが私の目的であるが、いまだにペースメーカー細胞たるに必要十分な条件(性質)は報告されていない。心臓ペースメーカー細胞を単離し、治療手段とするにはペースメーカー細胞たる必要十分条件を規定せねばならず、先ずはその探索を行った。方法としては未分化細胞の段階で心筋特異的プロモーターの下流にGFPを配置したプラスミドを導入し、心筋に分化した際には蛍光下で緑に光る細胞を分化誘導した。引き続きフローサイトメトリーにてGFP陽性細胞を心筋細胞として単離し、パッチクランプ法にて単一拍動心筋細胞の電気生理学的なイオンチャンネル解析を行った。その結果、いわゆる心臓ペースメーカー細胞と呼ばれる細胞にはHCNチャンネルとCavチャンネルが過剰発現しており、Kirチャンネルはダウンレギュレートされている事実が判明した。上記の事実よりチャンネル上の性質と照らし合わせて性質の一致する細胞を単離できれば心臓ペースメーカー細胞のみの回収が可能となる。ひいてはペースメーカー細胞の移植治療へと繋がっていく。また、すでにRNAiを用いて転写因子X遺伝子をRNAレベルで抑制することでHCNチャンネルの過剰発現、Cavチャンネルの過剰発現、Kirチャンネルの発現低下がおこることが分かっている。上記の事実を踏まえペースメーカー細胞の単離、同定、移植を目指して実験を進める予定である。

ES cell differentiation and cell transplantation therapy are essential conditions for the development of ES cells. The heart of the city is full of people, and the treatment method is full of people. Methods: To induce differentiation of undifferentiated cells in the presence of GFP in the downstream of the cell line. The analysis of GFP positive cells and the electrophysiological characteristics of the muscle cells was carried out by using the method of "fluorescence detection". As a result of this, we found that the cells in the heart of the brain were infected with HCN, and that the cells in the brain were infected with Kir. Note that the nature of the cell is consistent with the nature of the cell. The treatment of cell transplantation is very important. In addition, RNAi is used to write factor X gene, RNA, RNA, RNA and RNA. The above is a summary of the progress of cell separation, identification and transplantation.