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核内タンパク質のチロシンリン酸化による細胞核制御機構の研究

核蛋白酪氨酸磷酸化研究细胞核调控机制

基本信息

批准号：
19890039
负责人：
福本泰典
金额：
$ 1.05万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞内において非受容体型チロシンキナーゼ(NRTK)と相互作用するタンパク質を,すでに報告されている方法(Methods Enzymol,370,430,2003)に従ってNRTKを含むタンパク質の複合体として精製した。最初に,NRTKの一つであるLynを核局在化シグナルとの融合タンパク質として安定に発現する細胞株を樹立した。このNLS-Lyn安定発現株よりNLS-Lynと相互作用するタンパク質をNLS-Lynを含むタンパク質複合体として精製し,その構成因子を質量分析によって決定した。その結果,NLS-Lynと相互作用するタンパク質として,細胞周期,RNA代謝およびクロマチン制御に関わるタンパク質などが同定された。近年受容体型および非受容体型チロシンキナーゼが核内に存在することが示され,その細胞核機能への関与に興味がもたれているが,その機能と分子メカニズムに関する理解はまだ進んでいない。今回NRTKの一つであるLynの核内における相互作用タンパク質として細胞周期,RNA代謝およびクロマチン制御に関わるタンパク質が同定されたことは,それぞれのプロセスにおいてNRTKによる制御が存在する可能性を示している。一方で,NLS-Lynの安定発現株は細胞周期とDNA損傷応答に特徴的な表現型を示し,核内においてNRTKが細胞周期とDNA損傷応答に関与している可能性が示された。これまでのNRTKの核内での機能に関する報告の中では特にタンパク質-タンパク質相互作用に関わる報告がほとんどなされておらず,今回の我々の結果は今後のチロシンリン酸化による細胞核制御機構の解析のなかで重要な橋頭堡となるものである。

Intracellular non-receptor-type non-receptor type test (NRTK) and interaction test method (Methods) Enzymol, 370, 430, 2003) に従ってNRTKをcontaining むタンパクquality の Complex としてRefined した. At the beginning, NRTK's nuclear bureau was in charge of chemical fusion and stabilization and establishment of cell lines.このNLS-Lyn stable and stable current strain よりNLS-Lynとinteraction するタンパクquality をNLS- Lyn's quality-containing complex is refined and its constituent factors are determined by quality analysis.そのRESULTS, NLS-Lyn とinteraction するタンパク性として, cell cycle, RNA metabolism is the same as the control of RNA metabolism. In recent years, the accepted type and the non-accepted type have shown the existence and function of the nucleus in the nucleus.への关与に心丝がもたれているが, そのFUNCTION とmolecule メカニズムに关するUnderstanding はまだ入んでいない. This time NRTK's の一つであるLyn におけるinteraction タンパク性としてcell cycle,RNA metabolism およびクロマチンcontrolに关わるタンパク性が同定されたことは,それぞれのプロセスにおいてNRTK によるcontrol がexistent するpossibility をshow している. On the one hand, the cell cycle and DNA damage response of the NLS-Lyn stable strain are shown in the phenotype.し, the cell cycle and DNA damage response of NRTK in the nucleus are related to the possibility of している.これまでのNRTK's core function and function report The report of タンパク性-タンパク interacts with タンパククるがほとんどなされておらず,This chapter's の我々のRESULTは future's のチロシンリンacidificationによるThe analysis of the nuclear control mechanismのなかでimportant なbridgeheadとなるものである.