ヒト免疫構築マウスをもちいた感染症モデルマウスの樹立および末梢T細胞分化の解析

人免疫构建小鼠传染病模型小鼠的建立及外周T细胞分化分析

基本信息

批准号：
19700369
负责人：
小林直樹
金额：
$ 2.39万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19700369/
关键词：
ヒト免疫構築マウス T細胞分化感染症モデルマウス

项目摘要

小動物におけるヒト免疫系の構築およびヒト感染症のモデル動物の樹立を目指し、ヒト免疫構築マウスの作製を試みたところ、NOD/SCID/Jak3ノックアウトマウス新生仔の肝臓にヒトCD34陽性臍帯血幹細胞を移植することで、移植マウスの末梢血中にヒトB細胞と考えられたCD19陽性細胞およびヒトT細胞と考えられたCD3陽性細胞等の発生が認められた。そこで、ヒト免疫構築マウスにおけるヒトT細胞の分化・成熟について詳細な解析を行ったところ、CD8 T細胞およびCD4 T細胞の両者において、CD45RA+CCR7+CD27+CD28+のナイーブ表現型を示したT細胞が多く認められたマウス(Tn群)と、CD45RA-CCR7-CD27+CD28+のエフェクターメモリー表現型を示したT細胞は多く含まれていたが、ナイーブT細胞はほとんど認められなかったマウス(Tem群)の2群が確認された。しかしながら、いずれのマウスにおいても、エフェクター表現型を示した細胞は認められなかった。また、Tn群ではIL-2産生細胞が多かった一方、Tem群ではIFN-γやTNF-αを産生する細胞が多く、それぞれの群におけるT細胞の表現型を反映したサイトカイン産生能が確認された。CD8 T細胞の機能として重要な細胞傷害性因子の発現についても解析したところ、granzyme Aおよびgranzyme Bの発現は認められた一方、いずれのヒト免疫構築マウスにおいてもperforinの発現は全く認められなかった。したがって、ヒト臍帯血由来幹細胞の移入によって作製されたヒト免疫構築マウスでは、ヒトにおけるT細胞の発生・分化とは異なる結果、偏ったT細胞分布が生じていると考えられ、マウスにおいてヒト免疫系を構築するためには、サイトカインやケモカインが免疫細胞の分化・成熟に及ぼす影響等について詳細な解析が必要であると思われる。

In an attempt to construct a human immune system in small animals and establish a model animal for human infection, we attempted to create human immune constructed mice, and by transplanting human CD34-positive umbilical cord blood stem cells into the liver of a newborn baby NOD/SCID/Jak3 knockout mouse, we observed that CD19-positive cells thought to be human B cells and CD3-positive cells thought to be human T cells in the peripheral blood of the移植的小鼠。因此，在人类免疫构建小鼠中人类T细胞的分化和成熟的详细分析中，确认了两组：小鼠（TN组），许多T细胞表现出CD45RA+CCR7+CCR7+CCR7+CD27+CD27+CD28+的天真表型在小鼠（TEM组）中发现。但是，在任何一只小鼠中都没有观察到效应表型的细胞。此外，尽管TN组包含许多产生IL-2的细胞，但TEM组产生了许多IFN-γ和TNF-α，并确认了细胞因子的生产能力，反映了每组中T细胞的表型。当还分析了CD8 T细胞的重要功能的细胞毒性因子的表达，并且观察到颗粒酶A和颗粒酶B的表达，在任何人的免疫构建的小鼠中均未观察到proust蛋白。因此，人们认为，在人类脐带血液衍生的干细胞转移产生的人类免疫构造的小鼠中，由于人类中T细胞的分化和分化而产生了有偏见的T细胞分布，并且为了在小鼠中构建人的免疫系统，对细胞因子和趋化因子对免疫细胞的分化的影响的详细分析是必需的。