Vergleich der Vektorproduktion und Transduktionseffizienz verschiedener Amplikon/Retrovirus-Hybridvektoren in Neuroblastomzellen

神经母细胞瘤细胞中不同扩增子/逆转录病毒杂交载体的载体生产和转导效率比较

• 批准号: 5363430
• 负责人: Professorin Dr. Sabine Steffens
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Prophylaxe und Epidemiologie der Kreislaufkrankheiten
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5363430?language=en
• 关键词: Vergleich; der; Vektorproduktion; und; Transduktionseffizienz

Mit dem vorliegenden Projekt soll ein optimiertes Vektorsystem zur retroviralen Transduktion in Neuroblastomen entwickelt und geprüft werden. Als Ausgangskonstrukt dient ein virales Hybridvektorsystem mit dem genetischen Grundgerüst eines Herpes simplex Virus (HSV) Amplikons, in das alle zur Generierung von Moloney Murine Leukemia Virus (MuLV) Retrovirusvektoren notwendigen retroviralen Elemente eingebettet sind. Jede Neuroblastomzelle, die von diesem Herpes-Amplikon infiziert wird, wird selbst zur Produzentenzelle, die Retrovirusvektoren zur Infektion neuer Neuroblastomzellen herstellt und freisetzt. Das für die Virusanbindung an den zellulären Oberflächenrezeptor und damit für die Infektion letztendlich verantwortliche MuLV"envelope"-(Env) Hüllprotein soll im vorliegenden Projekt durch die Env-Proteine des Gibbon Ape Leukemia Virus (GALV), des Vesicular Stomatitis Virus (VSV) und des humanen Foamyvirus (HFV) ersetzt werden. Durch diesen als "Pseudotypisierung" bezeichneten Vorgang wird 1. eine Erhöhung des Retrovirustiters in Neuroblastomzellen nach HSV-Amplikon-Infektion und 2. eine Verbesserung der Infektion neuer Neuroblastomzellen erwartet. Eigene Vorversuche haben gezeigt, dass die Pseudotypisierung von MuLV-Retrovirusvektoren mit dem GALV-Env eine Erhöhung der Transduktionseffizienz von Neuroblastomzellen im Vergleich zum Standard-Vektor mit dem MuLV-Env erbringt. In der Weiterentwicklung des Amplikon/Retrovirus-Hybridvektors sollen schließlich die repliaktiven retroviralen MuLV-Elemente durch replikative retrovirale HFV-Elemente ersetzt und die entsprechenden Titer und Transduktionseffizienzen untersucht werden.

Mit dem vorliegenden Projekt soll ein optimiertes Vektorsystem zur retroviralen Transduktion in Neuroblastomen entwickelt und geprüft韦尔登.作为一种带有单纯疱疹病毒（HSV）扩增子的遗传学基础的病毒混合载体系统，在莫洛尼鼠白血病病毒（MuLV）逆转录病毒的所有遗传学中，没有任何逆转录病毒元素。因此，神经母细胞瘤，这种感染性疱疹病毒，将自行生产，逆转录病毒将感染新的神经母细胞瘤。Das für die Virus bindung an den zellulären Oberflächenrezeptor und dür die Infektion letztendlich verantwortliche MuLV“envelope”-（Env）Hüll protein soll im vorliegenden Projekt during die Env-Proteine des Giantape Leukemia Virus（GALV），des Vesicular Stomatitis Virus（VSV）und des humanen Foamyvirus（HFV）ersetzt韦尔登韦尔登.这是一个“假典型”的例子。HSV-Amplikon-Infektion和2.一种新的神经母细胞瘤感染。本研究的主要目的是通过GALV-Env的逆转录病毒假型化，将神经母细胞转化为标准载体，使其与GALV-Env融合。在扩增/逆转录病毒混合载体的体外培养中，通过复制逆转录病毒HFV-Elemente检测逆转录病毒MuLV-Elemente，并检测其滴度和转化率。