アフリカツメガエル卵母細胞における母性mRNAの翻訳制御機構の解析

爪蟾卵母细胞母体mRNA翻译控制机制分析

• 批准号: 19770205
• 负责人: 中村 依子
• 金额: $ 2.27万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19770205/
• 关键词: アフリカツメガエル; 卵母細胞; 母性mRNA; 翻訳制御; mRNP構成タンパク質

多くの動物の初期胚発生において重要な働きを持つ母性mRNAの翻訳制御は、遺伝子発現を時空間的に制御する上で重要なステップのひとつである。近年、母性mRNAの翻訳調節にはmRNP構成分子の役割が必要不可欠であることがわかってきたが、脊椎動物のmRNP構成分子、およびそれらの機能については不明な点が多い。本研究では、アフリカツメガエル卵母緬胞のmRNP構成タンパク質を解析し、卵母細胞における母性mRNAの翻訳制御機構を明らかにすることを目的としている。カエル卵母細胞の貯蔵mRNPを構成する主要なタンパク質のFRGY2は、結合するmRNAの翻訳に関与することが知られている。今年度は、FRGY2を含むmRNP複合体の構成因子としてP100タンパク質を同定し、その機能解析を行った。P100は卵母細胞の細胞質に存在し、未受精卵や初期胚では発現は見られない。また、密度勾配遠心法でmRNP画分に存在し、UV-crosslinkによりRNAと直接結合することから、P100はmRNP構成分子であると考えられた。卵母細胞抽出液からの免疫沈降と質量分析法によって、P100を含む複合体の構成タンパク質を調べたところ、FRGY2の他、Xp54、xRAP55、CPEBなどの、翻訳抑制に関与することが示されているmRNP構成因子が含まれていた。そこで、卵母細胞内にP100を過剰発現させ、翻訳に対するP100の効果を調べたところ、P100は卵母細胞内のグローバルなタンパク質合成は抑制しないが、mRNA特異的に翻訳を抑制する可能性が示唆された。

In the early stage of the multi-animal animal experiment, the important equipment is responsible for the control of maternal mRNA and the control of the time and space of the mother. In recent years, it is necessary for maternal mRNA to induce mRNP formation. It is necessary to make sure that it is necessary to make sure that the molecular weight of mRNP, the molecular weight of spinal fluid, and the number of unknown points are not known. In this study, the mRNP of oocytes was analyzed, and the maternal mRNA of oocytes was analyzed. The mRNP of the oocyte is different from that of the oocyte. The main reason is that the FRGY2 is the key to the oocyte. The combination of the FRGY2 and the mRNA is the best way to know. This year, FRGY2 contains the mRNP complex to generate factors. The P100 database is the same as the database, and the machine can parse the bank data. The P100 oocyte cells were present, and the early embryos of the unfertilized eggs were found to be pregnant. The existence of the density matching method, the center method, the mRNP analysis, the direct combination of the UV-crosslink RNA, and the molecular composition of the P100 mRNP. Oocyte cell extract, immuno-sedimentation assay, quantitative analysis, P100 containing complex, FRGY2, Xp54, xRAP55, CPEB, inhibition and inhibition showed that the factor containing mRNP contained DNA. The results show that there is a negative effect on the expression of P100 in oocytes, and mRNA in oocytes.