Thermodynamic analysis of chiral molecule recognition of enzymes

酶的手性分子识别的热力学分析

• 批准号: 19780075
• 负责人: KOGA Yuuichi
• 金额: $ 1.48万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19780075/
• 关键词: タンパク質工学; リパーゼ; 光学選択性; 結晶構造解析; 機能改変; たんぱく質工学; 結晶構造解

Burkholderia cepacia由来リパーゼの3-phenylbutyric acidに対する光学選択性を熱力学的、構造学的に解析を行った。光学選択性の改変された4重変異体4種類の大量生産系構築を行った。1リットルの培養液当たり233mg以上の組換えリパーゼの発現が確認された。精製酵素を用いて結晶化実験を行い、20-30%のイソプロパノールを共沈剤として用いた条件で針状結晶がえられ、X線回折データの取得を行った。また、キラルカラムを用いて、ラセミックな基質に対する選択的分解を観察する手法を開発した。

Burkholderia cepacia is derived from 3-phenylbutyric acid, which has optical selectivity, thermodynamic and structural analysis. The optical selectivity was improved by four different species and mass production system construction was carried out. 1. When the culture medium is more than 233mg, it is confirmed that the composition of the culture medium is changed. Refined enzyme crystallization process, 20-30% of the solution, coprecipitation process, X-ray crystallization process The method of decomposition of the matrix is developed.