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ルイス肺癌転移におけるIntegrin及びRho制御分子の共同作用機構の解明

阐明整合素和Rho调控分子在Lewis肺癌转移中的协同机制

基本信息

批准号：
19790228
负责人：
章青
金额：
$ 2.36万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19790228/
关键词：
癌転移 Cyr61 ARAP3 インテグリン増殖浸潤

项目摘要

1、マウスcDNAマイクロアレイにより高転移株の細胞で発現亢進が示されたインテグリンのリガンドであるCyr61、及びRhoファミリー活性の阻害因子(Rho-GAP)であるARAP3のmRNA及びたんぼく質レベルの発現変化をRea1-timeRT-PCR及びWestern-immunoblottingを用いて検討した。その結果、高転移株細胞での高発現が確認された。2、ARAP3のcDNA発現ベクターを作成して、親株のH7細胞に導入して、安定発現株を樹立した。3、MTTassay, Matrigel-invasion assay, scratching wound healing motility assayを用いて、樹立したARAP3安定発現株細胞の増殖能、浸潤及び運動能の変化を検討した結果、ARPA3安定発現株では、細胞増殖、浸潤及び移動性がすべて亢進することが判明した。4、更に、ARAP3安定発現株の細胞をマウスに注入し、in vivoにおける皮下注部位での増殖及び転移能に対するARAP3の影響を検討したところ、ARAP3高発現細胞では皮下移植病巣の増殖及び尾静脈注入による肺転移の亢進が認められた。以上の結果より、ARTP3は、Lewis肺癌において癌細胞の増殖及び転移を促進することが示唆された。今後、ARAP3の標的となるたんぱく質の同定及びCyr61、インテグリン、Rho-GAPなどの分子群の癌転移への関与と、そのときの分子間の相互作用のメカニズムを明らかにする。

1. The expression of ARAP3 mRNA and protein was investigated by Rea1-time RT-PCR and Western-immunoblotting. The results of the study confirmed the high level of expression of the high titer cells. 2. ARAP3 cDNA expression was successfully constructed, introduced into H7 cells, and stably established. 3. MTTassay, Matrigel-invasion assay, scratching wound healing motility assay were used to establish ARPA3 stable development cell proliferation, infiltration and motility changes were studied. ARPA3 stable development cell proliferation, infiltration and mobility were determined. 4. To investigate the effects of ARAP3 on cell growth and migration of stable ARAP3-producing strains after injection into vivo, subcutaneous injection site and tail vein injection. These results indicate that ARTP3 promotes the proliferation and migration of Lewis lung cancer cells. In the future, ARAP3 targets will be identified and identified by Cyr61, Cyr61, Cy