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完全長cDNAライブラリを用いたダニアレルギーワクチンの開発

利用全长cDNA文库开发尘螨过敏疫苗

基本信息

批准号：
12J40160
负责人：
二瓶秋子
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J40160/
关键词：
ダニアレルギーワクチン完全長cDNA

项目摘要

ダニアレルギーワクチンの開発基盤の確立を目的として、11,520のコナヒョウヒダニ由来完全長cDNAとその塩基配列を基に、新規ダニ抗原のスクリーニングを行った。これまでの研究成果により選択された20の既知抗原クローン群Dおよび20の新規抗原候補クローン群HAを、GeneGunを用いてマウスに免疫し、免疫応答を解析したところ、D, HAともに、ダニ抗原特異的な脾臓および所属リンパ節細胞の増殖およびサイトカイン産生量が、コントロールに比べて上がっていた。このことから、免疫したこれらのクローンによるマウス体内でのダニ特異的免疫応答の誘導が確認された。HAを、発現量の多かったものから5クローンずつ4つのサブセット(HA1, HA2, HA3, HA4)に分割し、同様の手法でマウスに免疫した後、ダニ特異的免疫応答を解析した。その結果、HA3を免疫したマウスの脾臓細胞において、ダニ抗原特異的なサイトカイン産生量が上昇しており、また、HA3免疫マウスの血清中に、ダニ抗原特異的なIgG産生が確認された。次に、HA3を構成する5クローンを個別にマウスに免疫し、同様の手法で免疫応答を解析したが、ダニ特異的な免疫応答を有意に誘導したクローンは無かった。これらの結果より、HAを構成する20のクローンのうち、マウスに免疫する事によりダニ特異的な免疫応答を誘導するクローンはHA3を構成する5つのクローンに絞り込まれた。しかし、これらの5つを個別に免疫するとその効果が見られなくなったことから、ダニ特異的免疫応答を誘導するためには複数のクローンを同時にマウスに免疫する必要がある可能性が示唆された。ここまでの成果は、第42回日本免疫学会にて発表した。一方で、本研究課題と同じスキームでマラリアワクチンのスクリーニングをおこなった研究を論文にまとめ、発表した(Exp、Parasitol. 2013)。

The purpose of establishing the development base of the protein is to establish a new gene for the protein of 11,520 bp, which is derived from the complete long cDNA sequence. The results of this study include the selection of 20 known antigen groups D and 20 new antigen candidate groups HA, GeneGun, and their use in immune response analysis. D, HA, and antigen-specific antigen groups D, D, HA, and D are used in cell proliferation and cell production of their respective nodes. In vivo, the induction of specific immune responses was confirmed. HA, the amount of discovery of multiple (HA1, HA2, HA3, HA4) in the division, the same method to The results showed that the production of antigen-specific IgG in the spleen cells of HA3 was increased, and the production of antigen-specific IgG in the serum of HA3 was confirmed. The HA3 is composed of five components: immune response, immune response. The results of this study are as follows: 1. HA composition: 20. Immune response: 1. Specific immune response: 1. HA composition: 1. The results of individual immunization are shown in the following table. The 42nd Japanese Immunology Society was founded. A party, this research topic and the same group of topics, the same group of topics, the same group 2013)。