肝臓特異的ハイドロダイナミック法による核酸医薬送達と肝癌遺伝子治療法への応用

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本研究は、ハイドロダイナミック遺伝子導入法(HGD)を肝癌治療に応用するための方法論、抗腫瘍効果を学術的に検証するためのステップと位置づけ、HGDパラメーターの確立、治療遺伝子の選択、効果と安全性の検証、肝癌モデル動物に対する治療効果の検証を行うことを目的とした。今年度は前二年度に肝癌の増殖制御に有用であることを明らかにした、ジフテリアトキシンA遺伝子を用いた肝癌に対する遺伝子治療確立のためのマウス肝癌モデルに対する遺伝子治療効果を検証した。これまでに、in vitroでは、ジフテリアトキシンA発現遺伝子が肝細胞癌に対して抗腫瘍効果を有することを明らかにし、同遺伝子を肝癌で発現するAFPのプロモーター制御下に発現するコンストラクトを作成した。今年度は、発がん遺伝子をハイドロダイナミック遺伝子導入法でマウス肝に遺伝子導入して作製したマウス肝癌モデルに対する、ジフテリアトキシン遺伝子Aの遺伝子治療効果を検討した。また、プロモーター選択性による遺伝子治療の安全性も検証した。具体的には、肝癌マウスモデルに対して、腫瘍発生の各段階において、ジフテリアトキシンA遺伝子発現コンストラクトによる遺伝子治療を行い、腫瘍数、腫瘍径、腫瘍マーカー、などにより治療効果を、血液生化学的評価による安全性の検討を行った。その結果、肝癌モデルマウスにおいても肝発癌率の抑制、腫瘍マーカーの低下を認め、ジフテリアトキシンA遺伝子による肝癌遺伝子治療の効果を実証することができた。またプロモーター選択性により、肝障害の観点からも安全な遺伝子治療が可能であった。本研究の成果により、プロモータ選択性によりジフテリアトキシンA遺伝子を用いた種々の悪性疾患治療が可能であることが示唆された。