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Quality assurance of human sperm in assisted reproductive technology

辅助生殖技术中人类精子的质量保证

基本信息

批准号：
19591914
负责人：
KANEKO Satoru
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Tokyo Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19591914/
关键词：
精子 DNA 2重鎖切断低酸素培養テロメア ICSI フローサイトメトリ染色体片側開裂

项目摘要

1. 従来の直交電極をswitchしてDNA超伸展を図る方法に代え、ターンテーブルを装備した電気泳動装置を開発した。サーボ制御により、ターンテーブルが首振り運動することにより、効率よくDNA fiberの伸張が行えるようになった。2. 細胞操作過程における酸素傷害を防止するため、低酸素で細胞操作、細胞培養装置を開発し,酸素濃度2.0%環境下で高精度細胞培養が行えるようになった。3. フローサイトメトリ(FCM)を用いて精子DNA量を評価した。射精精子のDNA量は大きくばらついていたが、精製によりDNA量がそろった精子が得られることが示された。4. ペプチド核酸プローブを用いるFISH法により、染色体末端、すなわちテロメア部位の高精度観察を行った。半数体である精子は理論上46のシグナルが得られる。射精精子のシグナル数はばらついており、FCMにおけるDNA量のバラツキは項目3の結果を支持した。5. 分離、調製した精子は一部を用いて機能評価(品質管理)を行うことが不可欠である。検査時間確保のためにも凍結保存が必要であり、受精能維持可能な凍結保存法を開発した。

1. In recent years, direct current switch and DNA overstretching methods have been used to install the swimming equipment and start the operation. In order to control and control the operation, the first step is to make sure that the DNA fiber is ready for the first time, and the speed is very high. two。 During the process of cell operation, it is necessary to prevent the production of low-acid bacteria, the operation of low-acid cells, and the start-up of cell culture equipment. In the environment of 2.0% acidity, high-precision cell culture is effective. 3. FCM was used to measure sperm DNA. Ejaculation sperm DNA count, sperm count, DNA count, sperm count, DNA count, DNA count, DNA 4. The nucleic acid was detected with high precision by FISH method, the end of the chromosome, the end of the chromosome and the position of the nucleic acid. In the theory of seminumeral sperm, there are 46 percent sperm in the theory. Ejaculatory sperm count, FCM count, DNA count, DNA 5. The separation and treatment of spermatozoa should not be owed by the use of mechanical energy management (quality management). Make sure that it is necessary to keep the necessary information and that the fertilization can be maintained during the first half of the day.