酵母発現系を用いた病原菌エフェクターの網羅的スクリーニングシステムの開発

利用酵母表达系统开发病原体效应子综合筛选系统

• 批准号: 19658035
• 负责人: 岸 文雄
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kawasaki Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19658035/
• 关键词: 肺炎クラミジア; エフェクター; 病原菌; III型分泌装置; 病原因子; スクリーニング; 酵母

本研究では、酵母発現系を用いたChlamydophila pneumoniae(C.pneumoniae)エフェクターの網羅的スクリーニングシステムの開発を目的に研究を行った。Tet-offプロモーターにより発現の調節が可能である酵母発現ベクターに組込んだアレイライブラリーを作製し、酵母の増殖抑制を指標にC.pneumoniae J138株機能未知遺伝子456個について、エフェクター分子の探索を試みた。このシステムにおいてエフェクターとして既に報告されているサルモネラエフェクター分子SopE2、エルシニアエフェクター分子YopEが酵母に対して増殖抑制を示し、このシステムが病原菌の種を超えたエフェクター分子の網羅的スクリーニングシステムとして機能することを確認している。そこで、C.pneumoniae機能未知遺伝子について解析を行ったところ、62個の増殖抑制を示すエフェクター候補分子を見いだすことに成功した(Biosci Biotechnol Biochem. 73 : 2261-2267, 2009)。またカルボキシペプチダーゼY-インベルターゼ融合蛋白質を用いた小胞輸送系の異常を検出するスクリーニングシステムも開発しており、現在このシステムを用いて小胞輸送に影響するエフェクター分子の同定を行っている。これらのスクリーニングシステムは分子遺伝学的手法が乏しく現在まで病原因子の特定がほとんどなされていないC.pneumoniaeの感染戦略を明らかにするうえで、その突破口なることが期待される。本研究により開発したシステムは多数の病原菌において活用できる汎用性を備えたシステムであり、今後さらに様々な病原菌へ適用することで、その感染戦略を明らかし、エフェクター分子を標的とした新たな分子標的薬剤の開発に繋がることが見込まれる。

This study was conducted to investigate the development of Chlamydophila pneumoniae(C.pneumoniae), a yeast development system. Tet-off regulation of yeast development is possible, and yeast growth inhibition is an indicator of C.pneumoniae J138 strain. 456 genes with unknown function are explored. This report identifies the function of the yeast growth inhibition molecule SopE2, SopE2, SopE 3, SopE2, SopE 2 C.pneumoniae, 62 candidate molecules for growth inhibition were successfully analyzed (Biosci Biotechnol Biochem. 73 : 2261-2267, 2009). The abnormal detection of cellular transport system using fusion protein was investigated. The molecular identity of cellular transport system affected by fusion protein was investigated. The molecular genetics of C.pneumoniae infection is expected to be improved by identifying specific pathogens. This study was conducted to explore the development of a new molecular target for most pathogens.

项目成果

鉄輸送体DMT1のリサイクリングエンドソーム標的化シグナル配列の解析

铁转运蛋白 DMT1 的回收内体靶向信号序列分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 田淵光昭;簗取いずみ;三棹聡美;岸文雄
• 通讯作者: 岸文雄

レトロマーは鉄輸送体のリサイクリングエンドソームヘの輸送に必須である

逆转录酶对于将铁转运蛋白转运至回收内体至关重要

• 发表时间: 2008
• 作者: 田淵光昭;簗取いずみ;岸文雄
• 通讯作者: 岸文雄

酵母発現系を用いた肺炎クラミジア病原因子エフェクターのスクリーニング

利用酵母表达系统筛选肺炎衣原体毒力因子效应子

• 发表时间: 2009
• 作者: Onouchi Y;Gunji T;Burns JC;Shimizu C;Newburger JW;Yashiro M;Nakamura Y;Yanagawa H;Wakui K;Fukushima Y;Kishi F;Hamamoto K;Terai M;Sato Y;Ouchi K;Saji T;Nariai A;Kaburagi Y;Yoshikawa T;Suzuki K;Tanaka T;Nagai T;Cho H;Fujino A;Sekine ;日高佑典;河合泰宏;河合亜希子;田淵光昭
• 通讯作者: 田淵光昭

レトロマーによる鉄輸送体のリサイクリングエンドソームヘの輸送調節

逆转录酶调节铁转运蛋白到回收内体的运输

• 发表时间: 2008
• 作者: 田淵光昭;簗取いずみ;岸文雄
• 通讯作者: 岸文雄

赤血球成熟過程における鉄取込み促進機構の解明

阐明红细胞成熟过程中促进铁摄取的机制

• 发表时间: 2008
• 作者: 田淵光昭;簗取いずみ;岸文雄
• 通讯作者: 岸文雄