生殖細胞特異的発現遺伝子GC－LRRファミリーの機能解析

生殖细胞特异性表达基因GC-LRR家族的功能分析

• 批准号: 22591812
• 负责人: 堀川 道晴
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010-04-01 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22591812/
• 关键词: 生殖医学; 不妊症; 精子形成; SEPTIN12; 無精子症; SNP; 生殖; 減数分裂; UBR2

不妊症における男性因子の重要性は広く認識されているものの、ヒト精子形成のメカニズムはほとんど明らかにされていない。一方マウスにおいては近年そのメカニズムは著明に解明されてきている。しかし、全てのノックアウトマウスの表現型がヒトにおいて忠実に再現されている訳ではない。この点がヒトの疾患原因遺伝子の同定をより難しくしている理由の一つである。そこで、近年マイクロアレイ法等の実験方法にてダイレクトにヒト疾患遺伝子を同定することが行われている。2006年マイクロアレイ法によりSCOSによる無精子症患者の精巣においてその発現が低下している遺伝子がいくつか同定された。そこで我々はそのうちの一つであるSEPTIN12遺伝子に着眼し解析を行った。まず大学の倫理委員会の承認を得た後に、全て文章によるインホームドコンセントを得て、組織学的にSCOSに起因する無精子症と診断された日本人患者100名及び妊孕性が確認されている正常コントロール140名から血液を採取し、DNAを抽出した。ヒトSEPTIN12遺伝子の全てのcoding regionに隣接するイントロン部位にプライマーを設定し、nested PCR法を行いダイレクトシークエンスによりmutation解析を行った。得られた結果を統計学的に解析しその有意差を検討した。解析の結果、エクソン2,4,5においてそれぞれ8つのsingle nucleotide polymorphism : SNPI-SNP8検出した。患者群と正常コントロール群でゲノタイプ及びアレルの出現頻度を検討したところ、SNP3,SNP4及びSNP6において患者群とコントロール群ではゲノタイプ、アレルの出現頻度ともに統計学的に有意な差を検出した。本研究によりヒトSEPTIN12遺伝子がヒト精子形成過程においてに重要な役割を担うことが強く示唆された。

尽管男性因素在不育中的重要性得到了广泛认可，但人类精子发生的机制在很大程度上是未知的。另一方面，近年来已经清楚地阐明了小鼠的机制。但是，并非所有的淘汰小鼠表型都是在人类中忠实地复制的。这就是为什么它使识别人类引起疾病基因更加困难的原因之一。因此，近年来，使用实验方法（例如微阵列方法）直接鉴定了人类疾病基因。一种2006年的微阵列方法鉴定出了几种基因，其表达在由SCOS引起的Azoospermia患者的睾丸中降低。因此，我们专注于其中一个，即SEPTIN12基因，并进行了分析。首先，在获得大学伦理委员会的批准后，获得了所有书面室内插座，并从100名日本患者中收集血液，这些患者因SCO和140例确认生育能力而被诊断为Azoospermia组织学，并提取了DNA。引物设置在与人Septin12基因的所有编码区相邻的内含子位点，使用嵌套的PCR通过直接测序进行突变分析。对获得的结果进行了统计分析，并检查了显着差异。分析的结果是，在外显子2、4和5中分别检测到八个单一核苷酸多态性：SNPI-SNP8。当在患者组和正常对照组中检查基因型和等位基因的发生频率时，在患者组中检测到基因型和等位基因的发生频率在SNP3，SNP4和SNP6中检测到基因型和等位基因的发生频率的显着差异。这项研究强烈表明，人类SEPTIN12基因在人类的精子发生过程中起着重要作用。

项目成果

Single-nucleotide polymorphisms in HORMAD1 may be a risk factor for azoospermia caused by meiotic arrest in Japanese patients

HORMAD1单核苷酸多态性可能是日本患者减数分裂停滞导致无精子症的危险因素

• DOI: 10.1038/aja.2011.180
• 发表时间: 2012
• 期刊: Asian J Androl
• 影响因子: 2.9
• 作者: Miyamoto T;et al.
• 通讯作者: et al.

異所性妊娠における薬物療法の工夫

宫外孕药物治疗的改进

• 发表时间: 2011
• 作者: 堀川道晴;ら
• 通讯作者: ら

抗グルタミン酸受容体抗体陽性辺縁系脳炎となった成熟奇形種の2例

成熟畸胎瘤抗谷氨酸受体抗体阳性边缘叶脑炎2例

• 发表时间: 2010
• 作者: 堀川道晴;ら;堀川道晴
• 通讯作者: 堀川道晴

腹腔鏡下手術時に核出した子宮アデノマトイド腫瘍の1例

腹腔镜手术中子宫腺瘤样瘤摘除1例

• 发表时间: 2010
• 期刊: 北海道産科婦人科学会会誌
• 作者: 横山成俊;他;堀川道晴
• 通讯作者: 堀川道晴

Single nucleotide polymorphism in the UBR2 gene may be a genetic risk factor for Japanese patients with azoospermia by meiotic airest

UBR2基因单核苷酸多态性可能是日本减数分裂无精症患者的遗传危险因素

• DOI: 10.1007/s10815-011-9576-y
• 发表时间: 2011
• 期刊: J Assist Reprod Genet
• 作者: Miyamoto T;Tsujimura A;Miyagawa Y;Koh E;Namiki M;Horikawa M;Saijo Y;Sengoku K
• 通讯作者: Sengoku K