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バイオリアクター技術と生体吸収性ポリマー、自己細胞による心臓人工弁の作成

使用生物反应器技术、生物可吸收聚合物和自体细胞制造人造心脏瓣膜

基本信息

批准号：
22591553
负责人：
小沼武司
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010-04-01 至 2013-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22591553/
关键词：
組織工学再生医療心臓弁バイオリアクター

项目摘要

生分解性ポリマーを応用した組織工学による弁膜組織研究は,新岡らがポリマーと血管細胞の共培養複合体から,羊で肺動脈-弁を再生に成功しているが,当施設で行った「自己骨髄細胞と吸収性ポリマーを用いた再生医工学による肺動脈弁の開発と臨床応用」では、約6ヶ月の生存実験の結果,同手技では肺動脈組織の再生は困難で,移植弁膜組織は肥厚、硬化及び退縮していた.以上より生体内のみでの自己骨髄細胞,ポリマーからなる弁組織の再生は困難であり、バイオリアクターを用いた再生弁の生体内での作成を試みるのが当研究の目的である。すなわち、細胞播種した生分解性組織をバイオリアクターで生体内移植前に数週間in Vitroで培養することによって、培養細胞がポリマーの間隙を細胞と細胞外間質で満たし周囲で立体構築するとこから、物理的強度とポリマーへの細胞の固着が増強される。これにより、生分解性ポリマーが生体内吸収される時の強度低下による弁機能不全の防止と、弁機能を維持しながら弁構造構築の進行を同時にする事が可能であると考えられる。培養過程では、生体内と同環境でかつ弁組織に力学的負荷がかからない培養環境とする目的で拍動性バイオリアクターを用いるが、数週間ごとの培養組織の培養状況、強度、さらに生体移植後の弁組織を経時的に機能的、組織学的検査により評価を行い、自己組織からなる移植生体弁の生体の循環動態内での生理的変化、反応、また将来的な臨床応用の可能性を検討したい。現在の進行状況は実験動物としてビーグル犬の骨髄液を5-10ml採取し,フィコー留法にて単核球成分のみ採取して培養を行いstroma cellを誘導。生分解性ポリマー(一弁つきの肺動脈弁(10X 20mm)に細胞播種後、バイオリアクター内で約4週間、37℃の培養液による拍動流(圧、流量調整により)により培養を行っている。

The study of membrane tissue in the study of biological decomposition and tissue engineering was successful in the regeneration of pulmonary artery in sheep. When the experiment was carried out, the results of survival and tissue engineering in 6 months showed that it was difficult to regenerate pulmonary artery tissue with the same technique. The graft membrane tissue is thickened, hardened and shrunk. The aim of this study is to investigate the difficulty of regeneration of bone marrow cells in vivo. Cell seeding and biological decomposition of tissue in vivo several weeks before transplantation in Vitro culture, cell culture and extracellular matrix in vitro structure, physical strength and cell fixation increased. This is the first time that the biological decomposition process has been performed, and it is possible to reduce the intensity of the absorption process in vivo, prevent the functional deficiency, and maintain the functional structure. Culture process, in vivo and in the same environment, the mechanical load of the tissue, the purpose of the culture environment, the activity of the culture tissue, the culture condition, the intensity, the function of the tissue after transplantation, the histological investigation, the evaluation, the tissue transplantation, the physiological change, the reverse, the dynamic circulation of the transplanted organism The possibility of future clinical use is discussed. The present situation is that 5-10ml of bone marrow fluid from animals and dogs is taken, and the stroma cell is induced in culture. Biodegradability of the culture medium (pressure, flow rate adjustment) at 37℃ for about 4 weeks after cell seeding.