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ＲＴーＬＡＭＰ法を用いたアルボウイルスの網羅的検索

使用 RT-LAMP 方法全面搜索虫媒病毒

基本信息

批准号：
22790587
负责人：
青山幾子
金额：
$ 3.82万
依托单位：
Osaka Prefectural Institute of Public Health
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22790587/
关键词：
RT-LAMP 感染症ウイルス

项目摘要

アルボウイルス感染症により、毎年海外で多数の感染者や死者が報告されており、わが国に入ってくる感染症も多様化している。これら感染症に対する検査法の確立は急務であり、本研究課題ではアルボウイルスの鑑別を、従来法よりも、より簡便で短時間に行う方法の開発を目的とする。本研究の対象として蚊媒介性疾患のフラビウイルスとアルファウイルス感染症をモデルとし、RT-LAMP(real-time reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification assay)法もしくはGENECUBE法を用いた網羅的検索法を構築する。本法により、アウトブレイク時に検体が急増しても迅速に対応することが可能となり、ベクターサーベイランスなど多検体のスクリーニングも簡便に実施できる。さらに、網羅的検索により未知のウイルスを検出することも可能となる。平成24年度は、RT-LAMP法用に作成したプライマーの感度が従来の遺伝子増幅法に比べ低かったため、RT-LAMP法と同様に短時間で反応ができ、かつ全自動で遺伝子解析が可能なGENECUBE Qprobe法を用いて、アルボウイルスの迅速診断法の開発を進めた。日本脳炎ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルスについて作成した検出系は、検出感度が現行のRT-PCR法やrealtimePCR法と同等もしくはそれ以上であり、作業が簡便かつ迅速であることから、非常に有用な検出法だと考えられた。今後、さらに網羅的検索ができるようプライマーを設計し、目的に応じて適した検査法を選択できるよう迅速診断法を確立する。

Most of the infected people in overseas countries reported that they were infected, reported that they died, and reported that most of them were infected in the country. In this study, we established an emergency program for infectious diseases. In this study, we focus on how to identify, treat, and defecate patients for a short period of time. In this study, mosquito-borne diseases, mosquito-borne diseases, In this law, the application of this law is due to the use of emergency equipment, the use of multi-body equipment, and so on. The search engine of the network or the network may not be affected by an unknown cluster. In the 24th year of Pingcheng, the RT-LAMP method is used to determine the sensitivity of the system, and the RT-LAMP method is used for short-time anti-detection and automatic analysis. The GENECUBE Qprobe method is used to improve the performance of the system. In Japan, the production system is established, the RT-PCR method is used, the realtimePCR method is the same, the operation is convenient, the operation is convenient, and it is very useful. In the future, the user name of the network will be designed, and the purpose of the network will be to select the fast failure method to make sure that the device is set up.