脳領域特異的プロサイモシンα欠損による精神神経疾患誘導とその分子機能基盤の解明

脑区域特异性前胸腺肽α缺乏诱导神经精神疾病及其分子功能基础的阐明

• 批准号: 24590115
• 负责人: 黒須 洋
• 金额: $ 3.41万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24590115/
• 关键词: プロサイモシンα; 脳神経疾患; 脳神経保護

平成２４年度に作製した脳領域特異的にProTαを欠損したマウスを用いて行動科学的解析を行った。その結果、野生型マウスと比べ脳領域特異的ProTα欠損マウスではProTαの本来の発現部位での欠損に依存すると推測されるいくつかの行動異常が観察された。このマウスは特異的な局所における神経細胞でのProTα欠損を生じることから、観察された行動異常は、ProTαの発現欠損による神経細胞ネットワークの脆弱性を反映した表現型であると推測できる。さらに、ProTαの発見の経緯である初代培養脳神経細胞に対する神経細胞死保護作用というin vitroでの作用を考慮すると、この結果はProTαが個体レベルにおいても神経細胞の機能亢進あるいは機能維持に関与していることを示すものと考えられる。今後は、本研究によって明らかとなった個体レベルでのProTαの神経機能の関与が、核内に存在するProTαの細胞内からの作用なのか、あるいは神経細胞外に分泌されたProTαの細胞外からの機能なのかを明確にする必要性があると考える。この課題に取り組むためには大量のリコンビナントProTαが必要となる。これまでのProTαの精製手法にはエンドトキシンの混入や蛋白質高次構造の崩壊という問題点を含む可能性が考えられた。そこで、GST融合蛋白質として作製したProTαをユニークなプロテアーゼにより切り出し回収するという新たな精製方法を確立し、in vivo投与に使用可能な高純度のProTαを大量に作製することにも成功した。この精製リコンビナントProTαは、脳領域特異的なProTα欠損マウスの行動異常レスキュー解析に使用できる有益なツールとなると考えられる。

In 2014, the company made a special effort to improve the quality of its products. As a result, wild-type mutations are more likely to occur than domain-specific mutations in ProT α. This is a reflection of the specific phenotype of the neuron's ProTα deficiency. In this paper, ProTα is considered to be the protective effect of cell death on primary cultured neurons. In the future, this study will clarify the relationship between the intracellular function of ProTα and the existence of ProTα in the nucleus, and the necessity of clarifying the extracellular function of ProTα in the extracellular secretion of ProTα. The problem is that a large number of people are required to participate in the project. The purification method of ProTα is to mix the protein with the high-order structure and to examine the possibility of the problem. The production of GST fusion protein was successfully carried out in large quantities using a novel purification method. This is a domain specific ProTα defect analysis.

项目成果

ＦＧＦ１９

FGF19

• 发表时间: 2013
• 期刊: 内分泌・糖尿病・代謝内科 (内分泌ホルモンのすべて)
• 作者: Miyagawa T;Morohashi Y et al.;黒須 洋
• 通讯作者: 黒須 洋