乳がんのエストロゲン細胞膜受容体GPR30変異を持つ染色体導入Tgマウスの解明

乳腺癌雌激素细胞膜受体 GPR30 突变染色体转基因 Tg 小鼠的阐明

• 批准号: 24791380
• 负责人: 高村 歩美
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24791380/
• 关键词: 実験外科学; エストロゲン; GPR30

エストロゲンの受容体は、核内受容体と細胞膜受容体に分類される。その作用は、核内受容体を介した遺伝子発現調節のみでは説明できないため、細胞膜受容体の探索が行われてきた。最近、細胞膜に存在するG protein-coupled receptor 30(GPR30)が発見され、予後の悪い卵巣・子宮ガンでその発現量に有意な増加や変異があることを見出した。GPR30の生理機能と疾患との関連性を明らかにするために、変異を持つ発現ベクターを用いたin vitro、in vivo解析を行う事を本研究の目的とした。まず、転写活性など生理的環境を整えるために正常型と変異型を安定に発現するBAC(bacterial artificial chromosome)ベクターの作製を行った。現在はこれらのBACベクターを用いたTgマウス作出に向けて維持管理中である。また、GPR30の生理機能を調べるために、Gタンパクの同定を行った。GPR30発現ベクターと種々のGタンパク発現ベクターを共発現させて、エストロゲン刺激時の細胞応答を測定することで、どのシグナル経路を介して作用するのかを調べた。今回用いたGタンパク発現ベクターは、刺激により活性化すると細胞内カルシウムを上昇させるキメラ型を用いた。つまり、fura-2を用いたカルシウムイメージングにより、GPR30がどのGタンパクを介しているのかが特定される。その結果、αサブユニットに分類されるGqを活性化することが示された。Gqは、ホスホリパーゼCを活性化しIP3を産生する。IP3によるカルシウム濃度変化により、血管収縮が制御される。閉経後のエストロゲンの減少とエストロゲン受容体GPR30発現の上昇が、どのように疾患に関与しているのか未解明な点が多い。本研究で明らかとなったGqを介したシグナル経路と病態との関連性を明らかにすることが今後の課題である。

Youdaoplaceholder0 エストロゲ と receptor, nuclear receptor と, cell membrane receptor に classification される. そ の role は を interface, within the nuclear capacity body し た heritage 伝 son 発 now adjust の み で は illustrate で き な い た め line, the cell membrane by let body の explore が わ れ て き た. Recently, cell membrane に す る G protein - coupled receptor 30 (GPR30) が 発 see さ れ, after to の 悪 巣 い eggs, uterine ガ ン で そ の 発 now quantity に intentionally な raised や - different が あ る こ と を shows し た. GPR30 の physiology と disorders と の masato even sex を Ming ら か に す る た め に, - different を つ 発 now ベ ク タ ー を with い た in vitro and in vivo analytical を doeth う を の purpose this study と し た. ま ず, planning to write activity な ど physiological environment を whole え る た め に normal type と - alien を settle に 発 now す る BAC (bacterial artificial chromosome) ベ ク タ ー の cropping を line っ た. Now は こ れ ら の BAC ベ ク タ ー を with い た Tg マ ウ ス make に to け て in maintaining management で あ る. Youdaoplaceholder0, GPR30 <s:1> physiological function を is regulated by べるために, and Gタ <e:1> パ <s:1> is also regulated by を row った. GPR30 発 now ベ ク タ ー と kind 々 の G タ ン パ ク 発 now ベ ク タ ー を 発 now total さ せ て, エ ス ト ロ ゲ ン stimulation の cells 応 answer を す る こ と で, ど の シ グ ナ ル 経 road を interface し て role す る の か を adjustable べ た. This reuse い た G タ ン パ ク 発 now ベ ク タ ー は, stimulating に よ り activeness す る と intracellular カ ル シ ウ ム を rise さ せ る キ メ を ラ model い た. つ ま り, fura - 2 を い た カ ル シ ウ ム イ メ ー ジ ン グ に よ り, GPR30 が ど の G タ ン パ ク を interface し て い る の か が specific さ れ る. Youdaoplaceholder0 そ results, αサブユニットに classification されるGqを activation する とが とが とが shows された. Gq, ホスホリパ ホスホリパ ゼCを activates <s:1> IP3を to produce する. IP3によるカ シウム シウム concentration variation によ, vascular constriction が control される. Closed after 経 の エ ス ト ロ ゲ ン の reduce と エ ス ト ロ ゲ ン by let body GPR30 発 is の rise が, ど の よ う に disorders に masato and し て い る の か not interpret な が い more. This study で Ming ら か と な っ た Gq を interface し た シ グ ナ ル 経 road と pathological と の masato even sex を Ming ら か に す る こ と が の subject in the future で あ る.