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Azacitidine耐性機序の解明に基づく新たな急性白血病治療戦略の確立

阐明阿扎胞苷耐药机制建立急性白血病治疗新策略

基本信息

批准号：
25461435
负责人：
永井正
金额：
$ 3.16万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25461435/
关键词：
azacitidine uridine-cytidine kinase THP-1 HL60 romidepsin Azacitidine Uridine-cytidine kinase 5-aza-2-deoxycytidine

项目摘要

ヒトazacitidine (AZA)耐性白血病細胞株(THP-1/AR、HL60/AR)において、AZA活性化プロセスの律速酵素であるuridine-cytidine kinase 2 (UCK2)遺伝子に、共通に認められる4箇所の点変異を見出した。この4箇所の変異を有するUCK遺伝子をTHP-1細胞で発現させたところ、AZAによるアポトーシス誘導が抑制され、AZAに対するIC50値の増加を認めた。一方、野生型UCK2遺伝子をTHP-1/ARで発現させたところ、AZAに対する感受性が回復した。このことから、UCK2遺伝子変異によるUCK活性の低下がAZA耐性に関与しているものと推察された。最近、抗アポトーシス因子であるBCL2L10の高発現がAZA耐性に関与していると報告された。THP-1/AR、HL60/ARでもBCK2L10の高発現を認めたが、BCL2L10 siRNAによってBCL2L10の発現を抑制しても、AZAに対する感受性の回復がみられなかった。従って、BCL2L10の発現異常は、THP-1/AR、HL60/ARにおけるAZA耐性機序には関与していないと考えられた。一方、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬romidepsinはTHP-1/AR、HL60/ARに対してもp16 mRNA発現量およびアポトーシスを誘導した。また、isobologram解析では、romidepsinとAZAの併用が細胞増殖を相加的に抑制することが示された。さらに、Balb/cAJcl-nu/nu マウスにHL60/AR細胞を移植したXenograft modelでも、romidepsinは腫瘍の増加を著明に抑制した。以上の結果から、romidepsinはAZA耐性細胞にも有効であり、AZAとromidepsinの併用投与は、AZA耐性細胞の増大を防止する可能性が示唆された。

Four different genes were identified in azetidine (AZA)-resistant leukemia cell lines (THP-1/AR, HL60/AR), which were identified by uridine cytidine kinase 2 (UCK2) gene. These four sites differ in the expression of UCK genes in THP-1 cells, in the inhibition of cell induction, and in the increase of IC50 values in AZA. A wild-type UCK2 gene THP-1/AR was detected and its susceptibility was restored. The difference between UCK activity and AZA tolerance was observed. Recently, high levels of BCL2L10 resistance to AZA have been reported. THP-1/AR, HL60/AR, BCK2L10 high expression recognition, BCL2L10 siRNA, BCL2L10 inhibition, AZA susceptibility recovery. AZA tolerance mechanism related to THP-1/AR, HL-60/AR and BCL-2L-10 abnormal occurrence The expression of p16 mRNA was induced by the enzyme inhibitor romidepsin THP-1/AR and HL60/AR. The combination of romidepsin and AZA in the analysis of isobologram and the inhibition of cell proliferation HL60/AR cells were transplanted into the Balb/caJcl-nu/nu cell line and the growth of the tumor was inhibited. The above results indicate that romidepsin can prevent the growth of AZA-resistant cells.