プラス鎖RNAウイルス感染時におけるオートファジーの役割と分子基盤の解明

阐明正链RNA病毒感染过程中自噬的作用和分子基础

基本信息

批准号：
25860339
负责人：
田端桂介
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25860339/
关键词：
オートファジーフラビウイルスアルファウイルス

项目摘要

本研究では、フラビウイルスおよびアルファウイルスを材料に用い、1）ウイルス感染におけるオートファジー誘導の生理学的意義、2）ウイルス感染によるオートファジー誘導の分子機構の二つのメインテーマについて解析を進めた。最終年度までに、フラビウイルスはオートファジーの機能もしくは一部をウイルス増殖時に利用していること、その一方でアルファウイルスは、オートファジーによってウイルス増殖が抑制されていることが明らかになった。同じプラス鎖RNAウイルスと言ってもウイルス増殖機構が異なることは、分子基盤を元にした治療や創薬を目指す上でも意義深い。また分子基盤解明に有用なツールの開発や関連宿主因子の新規同定に成功した。年度別の研究実績の概要について、平成２５年度には研究実施計画に基づき、オートファジー関連遺伝子（Atg16L1、FIP200、p62）欠損細胞を用いてウイルス増殖への影響を調べたところ、ウイルス増殖低下が観察された。一方、アルファウイルスではAtg16L1欠損細胞においては、逆にウイルス増殖の亢進が観察され、フラビウイルスとは異なるオートファジーの役割があると考えられる。また分子機構解析の上で有用になるツールの開発に成功した。これにより選択的オートファジーを検出でき、オートファジー機構の解明に役立つことが期待される。平成２６年度には、オートファジー阻害の別の方法としてAtg4Bの変異体の過剰発現でも、前年度同様の結果を得たことからオートファジーのウイルスによる生理的役割の違いを再確認することができた。さらに本年度は、ウイルス増殖とオートファジー誘導をつなぐ新規宿主因子の同定に成功しており、現在解析を進めている。

在这项研究中，将黄病毒和α病毒用作材料，并在两个主要主题上进行了分析：1）病毒感染自噬诱导的生理意义，以及2）病毒感染自噬诱导的分子机制。到最后一年，据揭示了黄病毒在病毒生长过程中使用自噬的功能或部分，而α病毒被自噬抑制。尽管它们被称为相同的阳性RNA病毒，但在瞄准基于分子的治疗和药物发现时，不同的病毒增殖机制也有意义。此外，我们已经成功地开发了用于阐明分子基础的工具，并成功识别了新的相关宿主因素。关于在2013年的研究结果概述时，当检查了缺乏自噬相关基因（ATG16L1，FIP200，P62）的细胞根据研究实施计划确定对病毒增殖的影响，并观察到病毒增殖的降低。另一方面，在α病毒中，在ATG16L1缺陷型细胞中观察到了病毒增殖的增加，并且人们认为自噬的作用与Flaviviruses具有不同的作用。我们还成功地开发了一种对分子机理分析有用的工具。这可以检测选择性自噬，并有望帮助澄清自噬机制。在2014年，作为自噬抑制作用的另一种方法，我们获得了与上一年相同的结果，结果是ATG4B突变体过表达作为自噬抑制的替代方法，并且我们能够重申由自噬在自噬中引起的生理角色差异。此外，今年，我们成功地确定了一种将病毒增殖和自噬诱导联系起来的新宿主因素，目前正在进行分析。