ミトコンドリアNa+/Ca2+交換体の機能制御とその破綻による病態生理

线粒体 Na+/Ca2+ 交换器的功能控制及其分解引起的病理生理学

• 批准号: 25870998
• 负责人: 藤井 誠
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25870998/
• 关键词: ミトコンドリア; Na+; Ca2+交換体; Na+/Ca2+交換輸送体

近年、ミトコンドリアにおける、ATP産生、アポトーシス誘導とミトコンドリアCa2+シグナリングとの関係が注目を集めている。本研究では、最近同定されたNCLX（ミトコンドリアNa+ / Ca2+交換体）に注目し、以下の解析を行った。まず、抗NCLX抗体を作製し、NCLXの組織分布を解析した。野生型マウス由来の各臓器の粗膜画分を用いてウェスタンブロティングを行い、各組織におけるNCLX発現量を比較した。その結果、NCLXは、心臓などの筋組織に多く発現していることを見いだした。また、血管平滑筋由来培養細胞を用いて共局在マーカーとの免疫染色を行い、NCLXがミトコンドリアに局在していることを明らかにした。Na+ / Ca2+交換体は、ミトコンドリアに発現するNCLX以外に、細胞膜に異なるタイプ (NCX、NCKX) が発現していることが知られている。そこで、NCLX特異的な機能を解析することを試みた。近年、立体構造が明らかにされた古細菌NCXのデータを元に、NCLX、NCKXの配列解析を行い、機能ドメインを推測した。これらの情報を元に、NCLX、NCKXの機能ドメインを入れ替えたキメラコンストラクトを作製した。NCLXの機能を個体レベルで解析するためには、NCLX遺伝子欠損マウスは必須であるが、現在までに報告はない。そこで、NCLX遺伝子欠損マウスの作製を行い、現在、NCLXホモ欠損マウスを得ている。今後は、これらのマウスの表現系を解析する事により、個体レベルでのNCLXの機能解析が進むものと思われる。

In recent years, the relationship between ATP production, ATP production and Ca2+ production has been focused on In this study, we focused on NCLX (Na+ / Ca2+ exchanger), which was recently identified. Analysis of tissue distribution of NCLX and the production of anti-NCLX antibodies The wild type of NCLX was isolated from various organs and compared with the wild type of NCLX. As a result, NCLX has been found to be more effective in the treatment of heart disease. The blood vessel smooth muscle origin culture is used for the immune staining, and the NCLX is used for the immune staining. Na+ /Ca2 + exchangers are found in cell membranes other than NCLX and NCX. NCLX-specific function analysis In recent years, three-dimensional structure of archaea NCX, NCLX, NCKX and their functional properties have been analyzed. The function of NCLX and NCKX is controlled by the user. NCLX's function is to analyze the individual, NCLX's function is to report the individual.そこで、NCLX遗伝子欠损マウスの作制を行い、现在、NCLXホモ欠损マウスを得ている。In the future, the expression system of NCLX will be analyzed, and the function analysis of NCLX will be improved.

项目成果

脂質シグナル研究のためのHPLC分析技術：イノシトールリン脂質 / イノシトールポリリン酸の分離と定量

用于脂质信号研究的 HPLC 分析技术：肌醇磷脂/肌醇多磷酸盐的分离和定量

• 发表时间: 2013
• 期刊: 日薬理誌
• 作者: 藤井 誠;喜多 紗斗美;平田 雅人;岩本 隆宏
• 通讯作者: 岩本 隆宏

Ca2+トランスポーターと循環器疾患

Ca2+转运蛋白与心血管疾病

• 发表时间: 2013
• 期刊: 医学のあゆみ
• 作者: 喜多 紗斗美;藤井 誠;岩本 隆宏
• 通讯作者: 岩本 隆宏

Rac1の光制御により生細胞のマクロパイノサイトーシス過程を顕微鏡で操作する

通过 Rac1 的光调节显微操作活细胞中的巨胞饮过程

• 发表时间: 2013
• 作者: 荒木 伸一;川合 克久;藤井 誠;江上 洋平
• 通讯作者: 江上 洋平