歯髄幹細胞を用いた遺伝性大脳白質形成不全症の細胞移植治療法の確立

牙髓干细胞治疗遗传性脑白质增生症细胞移植疗法的建立

• 批准号: 25871173
• 负责人: 中村 祥子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: National Center of Neurology and Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25871173/
• 关键词: 歯髄幹細胞; 細胞移植; 大脳白質形成不全症

本研究は、1)歯髄幹細胞の性状解析、2)未分化歯髄幹細胞の脳内でのオリゴデンドロサイト(ODCs)への分化能の検討、3)大脳白質形成不全症モデルマウスを用いた効果的な細胞移植治療法の検討、の3つを柱として研究を行った。平成27年は引き続き2）、3）について5週齢の幼若マウスで脳実質への移植治療効果の検討を行った。移植細胞の生着率は低く、個体全体の表現型改善や寿命延長に顕著な効果は見られなかった。しかし移植後4週で残っていた細胞はほぼODCsマーカーolig2陽性であり、移植後6週では成熟型ODCsマーカーMBPが核周辺に発現している細胞も観察された。MBP発現パターンから髄鞘化には至っていないと推察される。歯髄幹細胞が髄鞘化に至るのかを検証するにはより長期間生体内に存在した移植細胞を解析する必要があるが、幼若マウス移植では大脳白質形成不全症モデルマウスの平均寿命のため移植後6週以上の解析ができない。そこで新生児への細胞移植を行い、移植後12週でのサンプリングの途中で本研究は終了した。研究期間全体を通し、１）の歯髄幹細胞の性状解析結果を行い、２）３）については移植の時期・部位・方法などの検討を重ね、ODCsへの分化能や細胞移植治療効果の検討を行った。しかし新生児でも幼若マウスでも移植細胞の生着率は低く個体としての表現型改善や寿命延長の治療効果を示す効果的な細胞移植治療法の確立は残念ながら達成できなかった。ODCsへの分化能については、本研究期間内には髄鞘化までは確認できなかったため現段階での判断は難しい点もあるが、移植後の時間経過に伴い、歯髄幹細胞がin vitroでは発現していないODCsマーカーを発現し、分化・成熟していく様子が観察されたことから歯髄幹細胞がODCsへの分化能を持ちうると考えられ、大脳白質形成不全症の移植細胞リソースとして有用である可能性を示した。

This study is aimed at: 1) characterization of dental stem cells; 2) identification of differentiation potential of undifferentiated dental stem cells; 3) evaluation of cell transplantation therapy for large linear imperfection; and 3) further research. 2), 3), 5 weeks after transplantation, the results of transplantation therapy were investigated. The survival rate of transplanted cells is low, the phenotype of the whole individual is improved, and the life span is prolonged. 4 weeks after transplantation, the residual cells were found to be positive for ODC, and 6 weeks after transplantation, the mature cells were found to be positive for MBP. The MBP is ready to launch a new project. The analysis of the existence of transplanted cells in long-term survival is necessary if the transplanted cells are not fully formed in large lines. This study was completed at the beginning of neonatal cell transplantation and 12 weeks after transplantation. During the study period, the whole population was informed; 1) the analysis results of the characteristics of dental stem cells were carried out; 2) the investigation of the time, site and method of transplantation was carried out; and the investigation of the therapeutic effect of differentiation of ODCs was carried out. The growth rate of transplanted cells is low, the phenotype is improved, and the therapeutic effect is prolonged. The differentiation ability of ODCs was confirmed during the study period, and it was difficult to determine the current stage. The time after transplantation was accompanied by the development of ODCs in vitro. The differentiation and maturation of ODCs were observed. The differentiation ability of ODCs was maintained. The possibility of transplantation of cells with large linear defects was demonstrated.