睡眠調節関連遺伝子の転写制御ネットワークの解明

阐明睡眠调节相关基因的转录控制网络

• 批准号: 08F08722
• 负责人: 裏出 良博
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08F08722/
• 关键词: プロスタグランジンD_2; リポカリン型PGD合成酵素; 生理的睡眠; flox-L-PGDSマウス; アデノ随伴ウイルス; くも膜; 脈絡叢; オリゴデンドログリア細胞; 神経科学; 軟髄膜; siRNA; リポカリン型プロスタグランジンD合成酵素; プロスタグランジンD2; 転写因子; クロマチン免疫沈降(ChIP)

動物の生理的な睡眠は、リポカリン型プロスタグランジン(PG)D合成酵素(L-PGDS)/PGD_2/DP_1受容体系により制御される。脳内のPGD_2供給源として、くも膜、脈絡叢、オリゴデンドログリ細胞の3種類が考えられる。我々は、睡眠誘発に関与するPGD_2の産生を行う細胞を同定する為に、Creリコンビナーゼを発現したアデノ随伴ウイルス(AAV)をflox-L-PGDSマウスに感染させ、其々の細胞に特異的なL-PGDS KOマウスの作製を試みた。くも膜:L-PGDSは、くも膜柱状細胞に最も強く局在するので脳内におけるPGD_2の主な供給源と考えられる。成体マウスの脳のくも膜全体へのAAV感染は困難なので、生後二日の新生仔マウスを用い、数種類の血清型(1,2,5,8,9,10,11)の異なるAAVをテストした結果、血清型8のAAVがくも膜に効率的に感染した。この手法を用いて、くも膜のL-PGDSを特異的にノックアウトしたマウスを数匹作製した。脈絡叢:血清型5のAAVが脈絡叢に高い親和性を示したので、血清型5のCreリコンビナーゼ発現AAV(50μl)をflox-L-PGDSマウスの脳室内に注入し、4週間後の睡眠を測定した。しかし、この遺伝子操作マウスと野生型マウスの間で睡眠の差異は認められなかった。従って、睡眠調節における脈絡叢の役割は小さいと考えられる。オリゴデンドログリア細胞:この細胞は脳全体に分布するので、AAVを完全に感染させることは困難である。そこでflox-L-PGDSマウスとNestin-Creトランスジェニック・マウスを交配して、脳実質でのL-PGDSノックアウトマウスを作製した。これらの3種類の細胞特異的なL-PGDS KOマウスは、生理的な睡眠の制御におけるL-PGDS/PGD_2/DP_1受容体系の役割を解き明かすために極めて有効である。

The physiological control system of L-PGDS/PGD_2/DP_1 receptor system in animals was established. Three kinds of PGD_2 supply sources in the brain were examined: membrana, choroid plexus, and thyroid gland. We are concerned with the production of PGD_2 and the regulation of its activity by flox-L-PGDS. L-PGDS and L-PGDS columnar cells are the most powerful sources of PGD_2 in the interior of the cell. AAV infection was difficult in all adult and neonatal populations, and varied among several serotypes (1, 2, 5, 8, 9, 10, 11). AAV infection was more frequent in serotype 8. This method is used in the L-PGDS. Choroid plexus: Serotype 5 AAV showed high affinity for choroid plexus, serotype 5 Cre protein was not found in AAV(50μl), flox-L-PGDS was injected into the chamber, and sleep was measured after 4 weeks. The difference in sleep between wild-type and wild-type is recognized. In addition, sleep regulation and choroid function are also discussed. AAV infection is difficult because it is distributed throughout the cell. Nestin-Cre-Tr These three kinds of cell-specific L-PGDS KO systems are related to physiological sleep regulation. The L-PGDS/PGD_2/DP_1 receptor system is related to physiological sleep regulation.

项目成果

Functional role of lipocalin-prostaglandin D2 synthase in the leptomeninges for sleep regulation

软脑膜中脂质运载蛋白-前列腺素 D2 合酶对睡眠调节的功能作用

• 发表时间: 2009
• 作者: Siemieniuch M;Bowolaksono A;Skarzynski DJ;Okuda K;Marta J.Siemieniuch;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;陳力衛;沖森卓也 編;中山緑朗・飯田晴巳・陳力衛・木村義之・木村一;CHERASSE Yoan
• 通讯作者: CHERASSE Yoan