Thypanosama bruceiにおけるプロスタグランジン生合成経路

布氏斜囊前列腺素生物合成途径

• 批准号: 11877047
• 负责人: 裏出 良博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877047/
• 关键词: プロスタグランジン; PGF合成酵素; プロトゾア; トリパノソーマ; アフリカ睡眠病

我々はアフリカ睡眠病の病原寄生虫であるトリパノソーマ(Trypanosoma brucei)が、アラキドン酸からプロスタグランジン(PG)D2・E2・F2αを合成することを見出した。T.bruceiのPG合成活性は、熱処理により失活し、ヒトのシクロオキシゲナーゼ阻害剤である非ステロイド性抗炎症剤(インドメタシン・アスピリン)により阻害されないことから、哺乳類のシクロオキシゲナーゼとは異なる酵素系により触媒されることが明らかになった。さらに、T.bruceiの可溶性画分に、PGD2・E2・F2αの共通前駆体であるPGH2をPGF2aに還元するPGF合成酵素活性を検出し、本酵素をSDS電気泳動上均一に精製した。さらに、精製酵素のリジルエンドペプチダーゼ処理により得られたヘプチドのアミノ酸配列を決定し、その配列に基いて合成したオリゴヌクレオチドを用いたRT-PCRにより、T.bruceiのPGF合成酵素をコードする全長cDNAをクローニングした。得られたcDNAから予想されるアミノ酸配列を用いた相同性検索の結果、T.bruceiのPGF合成酵素はアルド・ケト還元酵素遺伝子ファミリーに属し、且つ、動物や細菌のアルド・ケト還元酵素とは進化的にかけ離れた新しいメンバーであり、病原寄生虫リーシュマニアにおいて報告されているアルド・ケト還元酵素類似蛋白質と進化的に最も近縁関係にあった。PGF2αは哺乳類の生殖に重要な機能を担っている物質であり、トリパノソーマ感染症患者ではPGF2αの過剰生産や、それに伴う不妊が報告されている。従って、寄生原虫由来のPGF2αがトリパノソーマ感染症における不妊の一因として作用する可能性が考えられる。

The pathogenic parasite of sleep disease, Trypanosoma brucei, was synthesized by D2·E2·F2α. PG synthesis activity of T.brucei is inactivated by heat treatment, and the inhibitor is a non-inflammatory anti-inflammatory agent. The inhibitor is a catalyst for mammalian enzymes. In addition, the soluble fraction of T.brucei, the common precursor of PGD2·E2·F2α and the activity of PGF synthase in PGF2a were detected and purified. In addition, the purification of enzymes in the process of gene sequencing, gene sequencing, gene sequencing and gene sequencing in the use of RT-PCR, T.brucei synthase gene sequencing. The results of identity assay of PGF synthase from T.brucei and PGF synthase from T.brucei were obtained. Pathogenic parasites are reported to be closely related to the evolution of protein-like enzymes PGF2 α plays an important role in mammalian reproduction. PGF2α is produced in patients with infectious diseases. A possible role of PGF2α in the development of infectious diseases