权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

7回膜貫通G蛋白質共役型受容体のパルミトイルトランスフェラーゼの解析

7种跨膜G蛋白偶联受体的棕榈酰转移酶分析

基本信息

批准号：
08J01121
负责人：
大野祐介
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

哺乳類に約千種類存在する7回膜貫通G蛋白質共役型受容体(GPCR)は,特異的なリガンドによる刺激を受け取ることで,細胞内へシグナルを伝達する。GPCRのパルミトイル化は受容体の細胞膜発現や,シグナル伝達活性,脱感作過程などを制御することが知られているが,GPCRのパルミトイル化を担う酵素は未だ不明である。近年,DHHCシステインリッチドメインをもつ蛋白質(DHHC蛋白質)がパルミトイルトランスフェラーゼ(PAT)であることが明らかとなってきたことから,本研究ではDHHC蛋白質によるGPCRへのPAT活性の解析,GPCRの機能制御機構解明を目的とした。前年度では,酵母DHHC遺伝子欠損株の解析から,酵母に発現させたヒトDHHC蛋白質が正常に機能し,PAT活性を持つことを明らかにしたが,ヒトDHHC蛋白質による特定の基質へのパルミトイル化の検出まで進展していなかった。そこで本年度ではまず,GPCRと類似したパルミトイル化パターンをもつ酵母蛋白質Agp1に対するヒトDHHC蛋白質のPAT活性を解析した。その結果,酵母DHHC遺伝子akr1, erf2の二重欠損株ではAgp1のパルミトイル化が消失していたが,この株にDHHC-2,-3,-7,-15,-20,-21を導入した株ではAgp1のパルミトイル化が野生株と同程度起こり,DHHC-5,-6,-8,-10,-14,-18を導入した株ではパルミトイル化が中程度起こることを見出した。また,シナプス後膜においてシグナル因子集積の足場蛋白質として機能するPSD-95は,DHHC-2,-3,-7,-15によりパルミトイル化されることが報告されているが,本研究における酵母を用いた系においても同様のPAT活性が確認できたことから,酵母を用いた系のヒトDHHC蛋白質の機能解明への有用性が示された。このアッセイ系を用い,GPCRのPATの同定及びGPCRに対するDHHC蛋白質の基質特異性の解明を今後も継続していきたいと考えている。

In about a thousand species of mammals, there are receptor 7 membrane receptor G protein co-service receptor (GPCR). The special receptor receptor stimulates the recipient to obtain the receptor, and the intracellular receptor reaches the level. The cytomembrane of the recipient was detected by GPCR, the activity was achieved, and the desensitization was performed in the process. The enzyme was not known in the process, and the enzyme was not known. In recent years, DHHC protein (DHHC protein), protein (DHHC), protein, protein, In the previous year, the yeast DHHC gene was not available for further analysis. The yeast strain showed that the DHHC protein was detected in the normal cell cycle, the PAT activity was detected in the enzyme assay, and the DHHC protein activity was detected in the enzyme-specific assay. This year's GPCR category is similar to that of yeast protein Agp1 protein PAT activity analysis. The results showed that the yeast DHHC strain akr1, the erf2 strain double deficient strain, the Agp1 strain, the wild strain, the wild plant, the wild plant, the wild -18 days later, the temperature of the plant has changed since the beginning of the day. In this study, yeast was used to determine the PAT activity of yeast in this study. In this study, yeast was used in this study to determine the molecular weight of PSD-95, DHHC-2,-3,-7,-15, protein, protein and protein. Yeast yeast can be used to determine the usefulness of DHHC protein in yeast. The GPCR PAT is the same as that of the DHHC protein and the gene specificity of the DHHC protein in the future.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Feedback inactivation of D-serine synthesis by NMDA receptor-elicited translocation of serine racemase to the membrane

DOI：
10.1073/pnas.0809442106
发表时间：
2009-05-05
期刊：
PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
影响因子：
11.1
作者：
Balan, Livia;Foltyn, Veronika N.;Wolosker, Herman
通讯作者：
Wolosker, Herman

ヒトDHHC蛋白質のパルミトイルトランスフェラーゼ活性の解析

人DHHC蛋白棕榈酰转移酶活性分析