多糖結合ドメインを付加したキチナーゼおよびβ-1,3-グルカナーゼの性質検討

添加多糖结合域的几丁质酶和 β-1,3-葡聚糖酶的表征

• 批准号: 08J01775
• 负责人: 小泉 直也
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J01775/
• 关键词: キチナーゼ; β-1,3-グルカナーゼ; 多糖結合ドメイン; キメラ酵素; キチン; β-1,3-グルカン; 抗真菌活性

好アルカリ性放線菌Nocardiopsis sp.F96株由来のキチナーゼ(ChiF1)およびβ-1,3-グルカナーゼ(BglF)の機能向上および抗真菌活性の向上を目的として、これらの多糖分解酵素に多糖結合ドメインを付加したキメラ酵素を構築し、酵素学的性質検討を行った。多糖結合ドメインとして、Bacillus sp.J813株由来キチナーゼのキチン結合ドメインおよびBacillus circulans IAM1165株由来β-1,3-グルカナーゼのグルカン結合ドメインを用いた。キチン結合ドメインを付加したChiF1は不溶性キチンへの結合能が向上し、それに伴い加水分解活性が向上した。一方、グルカン結合ドメインを付加したBglFは種々の不溶性グルカンに対する結合能が向上し、キチン結合ドメインを付加したBglFは不溶性キチンだけでなくβ-1,3-グルカンに対する結合能の向上もがみられた。さらにこれらのキメラ酵素は不溶性β-1,3-グルカン加水分解活性の向上がみられた。また、多糖結合ドメインを付加した一部のキメラ酵素においては耐熱性の向上や、反応至適pHの変化がみられた。本研究で構築したこれらキメラ酵素の抗真菌活性を調べた結果、Trichoderma virideに対して抗真菌活性の向上がみられた。また、キチナーゼとβ-1,3-グルカナーゼを併用した際に抗真菌活性が相乗的に活性が高まることが示され、今後、本研究で構築したこれらキメラ酵素の抗真菌剤への応用が期待される。

Good ア カリ カリ actinomycetes Nocardiopsis Sp. F96 plant origin の キ チ ナ ー ゼ (ChiF1) お よ び beta - 1, 3 - グ ル カ ナ ー ゼ (BglF) の function upward お よ び antifungal activity の を up purpose と し て, こ れ ら の polysaccharides decompose ferment に combining ド メ イ ン を plus し た キ メ を build し ラ enzyme, enzyme properties of line beg を 検 っ た. Polysaccharides combined with ド メ イ ン と し て, Bacillus sp., J813 plant origin キ チ ナ ー ゼ の キ チ ン combining ド メ イ ン お よ び Bacillus circulans IAM1165 plant origin beta - 1, 3 - グ ル カ ナ ー ゼ の グ ル カ ン combining ド メ イ ン を with い た. キ チ ン combining ド メ イ ン を plus し た ChiF1 は insoluble キ チ ン へ の binding energy が し upward, そ れ に with い hydrolytic decomposition activity が upward し た. Side, グ ル カ ン combining ド メ イ ン を plus し た BglF は kind 々 の insoluble グ ル カ ン に す seaborne る binding energy が し upward, キ チ ン combining ド メ イ ン を plus し た BglF は insoluble キ チ ン だ け で な く beta - 1, 3 - グ ル カ ン に す seaborne る binding energy の upward も が み ら れ た. Youdaoplaceholder0 がみられた れら キメラ キメラ キメラ enzyme insoluble β-1,3-グ カ カ <e:1> water decomposition activity <s:1> upward がみられた. ま た, polysaccharide combining ド メ イ ン を plus し た a の キ メ ラ enzyme に お い て は の や upward heat resistance and anti 応 to optimum pH の variations change が み ら れ た. で this study constructs し た こ れ ら キ メ ラ enzyme の antifungal activity を adjustment べ た results, Trichoderma viride に し seaborne て antifungal activity の upward が み ら れ た. ま た, キ チ ナ ー ゼ と beta - 1, 3 - グ ル カ ナ ー ゼ を and し た interstate に antifungal activity が phase 乗 に high active が ま る こ と が shown さ れ, in the future, this study で build し た こ れ ら キ メ ラ enzyme の antifungal tonic へ の 応 with が expect さ れ る.

项目成果

Additional Carbohydrate-Binding Modules Enhance the Insoluble Substrate-Hydrolytic Activity of β-1,3-Glucanase from Alkaliphilic Nocardiopsis sp F96

• DOI: 10.1271/bbb.80846
• 发表时间: 2009-05-01
• 期刊: BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 1.6
• 作者: Koizumi, Naoya;Masuda, Sumiko;Nakamura, Satoshi
• 通讯作者: Nakamura, Satoshi

多糖結合ドメインを付加した放線菌由来ファミリー18および19キチナーゼの性質検討

添加多糖结合域的放线菌衍生家族 18 和 19 几丁质酶的表征

• 发表时间: 2009
• 作者: N. Koizumi;S. Masuda;K. Maeda;Y. Isoda;R. Yatsunami;T. Fukui;S. Nakamura;小泉直也
• 通讯作者: 小泉直也