微生物の生産するβ-1,3グルカナーゼに関すル研究

微生物产生β-1,3葡聚糖酶的研究

• 批准号: 04660108
• 负责人: 田中 啓達
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04660108/
• 关键词: β-1,3 glucanase; ドメイン構造; 基質への吸着; ArthroBacter

Bacillus circulans WL-12はβ-1,3 gucan を基質として倍養すると、倍地中に多数のβ-1,3 glucanase を産生する。その内β-1,3 glucan の分解に最も重要と考えられる glucanase Al を大腸菌にクローン化し、塩基配列を決定した。複数のβ-1,3 glucanase の内われわれがA2 A3、A4と呼んでいる酵素はA1からタンパク質分解酵素の作用により生じたものと考えられた。市販のタンパク分解酵素トリプシン、キモトリプシン、パパインを作用させた所活性をもつA2、A3、A4と同じ分子量のものが得られた。N末端アミノ酸分析からこれらはA1から3つのドメインがつぎつぎ失われて生ずることが明になった。またA1には1つのタンパク分解酵素の作用を比較的受け難いドメインが存在し、その間に短かいタンパク分解酵素の作用を受け易いアミノ酸配列があると考えられた。N末端の3つのドメインは基質への吸着に重要であることが明らかになった。原核細胞のβ-1,3 glucanase をコードする遺伝子をクローン化し、塩基配列を決定したのはわれわれが初めてである。今回放線〓に近縁の Arthrobacter sq YCWD3のβ-1,3 glucanase I をコードする遺伝子 glcI(既に大阪大学産業技術研究所土井博士によってクローン化されたもの)の塩基配列の決定とアミノ酸配列の推定を行った。その結果548aaをコードしている1647bqのORFを含んでいることが判った。本酵素と Bacillus circulans WL -12のglucanase AIと間にはアミノ酸配列の相同性は見付からなかった。Oerskovia xanthinoelytica のβ1,3glucanaseとは全域に亙って、またcastor bean の aglutinin や siun のC末端付辺で類似性か見付かった。

Bacillus circulans WL-12 produces most of the β-1,3 glucanases in the substrate. The most important factor in the decomposition of β-1,3 glucan is the determination of glucanase Al in Escherichia coli. The function of β-1,3 glucanase in A2, A3 and A4 was studied. The activity of the enzyme A2, A3, A4 and the molecular weight of the enzyme A2, A3, A4 are determined. N-terminal acid analysis: A1, A3, A4, A5, A6, A7, A8, A9, A A1 is the most difficult to compare with the action of the enzyme. It is difficult to compare with the action of the enzyme. The N-terminal is important for the adsorption of the substrate.β-1,3 glucanase in prokaryotic cells is the first enzyme to be transformed and the second enzyme to be aligned. Determination of nucleotide alignment and estimation of nucleotide alignment of Arthrobacter sq YCWD3 in the present study were performed using the β-1,3 glucanase I gene of Arthrobacter sq YCWD3 (developed by Dr. Doi, Osaka University Institute of Industrial Technology). The result is 548aa, 1647bq and ORF. The enzyme Bacillus circulans WL-12 glucanase AI has the same identity as Bacillus circulans WL-12 glucanase AI. Oerskovia xanthinoelytica β1,3glucanase