カイコにおけるファンコニ貧血原因遺伝子群に依存したDNA修復経路の解析

家蚕范可尼贫血基因 DNA 修复途径分析

• 批准号: 08J02957
• 负责人: 管原 亮平
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J02957/
• 关键词: DNA修復; 昆虫培養細胞; タンパク質翻訳後修飾

カイコのFancD2は一過的に発現させた条件下で非常にモノユビキチン化されにくい現象は前年度までにすでに報告していたが、本年度は恒常的に発現させたFancD2はMMCという薬剤依存的に、高い割合でモノユビキチン化されるということを明らかにした。さらにこのユビキチン化には、FancI, FancL, FancMというタンパク質がそれぞれ要求され、Usplというタンパク質はモノユビキチン化に対し抑制的に働くということも、欠損細胞の系で明らかにした。さらに、ファンコニタンパク質がMMC薬剤に対する抵抗性に必要であるのかどうかを細胞増殖試験によって検討した結果、FancD2, FancI, FancL, FancMをそれぞれ欠損した細胞では、MMC薬剤に対して感受性を呈し、DNA二重鎖間架橋修復に必要であることが示唆された。次に、FancMについて詳細な解析を行った。ウェスタンブロットのバンドシフト解析によりFancMは培養細胞内で一過的に発現させた際、リン酸化修飾が起こっていることが明らかになった。昆虫ツーハイブリッドの系により、Mhfl, Rmilというタンパク質とそれぞれ相互作用することを明らかにした。FancMがこの二つのタンパク質と相互作用する領域はそれぞれ異なっており、Mhflとの相互作用ドメインの方が、RmilのそれよりN末端側であった。RMilとFancMの相互作用には、RMil上にある二つ目のOB-foldが必須であることも明らかになった。以上をまとめると、カイコのファンコニ経路では、ヒトの経路と類似した機構が保持されていると思われる。

カ イ コ の FancD2 は one of に 発 now さ せ で た conditions very に モ ノ ユ ビ キ チ ン change さ れ に く い phenomenon は before annual ま で に す で に report し て い た が, this year's は constant に 発 now さ せ た FancD2 は MMC と い う 薬 tonic dependent に, high い cut で モ ノ ユ ビ キ チ ン change さ れ る と い う こ と を Ming ら か に し Youdaoplaceholder0. さ ら に こ の ユ ビ キ チ ン change に は, FancI, FancL, FancM と い う タ ン パ ク qualitative が そ れ ぞ れ requirements さ れ, Uspl と い う タ ン パ ク qualitative は モ ノ ユ ビ キ チ ン change に し inhibition of seaborne に 働 く と い う こ と も, owe damage cells の で and Ming ら か に し た. さ ら に, フ ァ ン コ ニ タ ン パ ク qualitative が MMC 薬 tonic に す seaborne る resistance に necessary で あ る の か ど う か を test cells raised colonization に よ っ て beg し 検 た results and FancD2, FancI, FancL, FancM を そ れ ぞ れ owe loss し た cells で は, MMC 薬 tonic に し seaborne て susceptibility を し, double lock bridge between DNA repair に necessary で あ る こ と が in stopping さ れ た. The following に, FancMに に て て て detailed な analysis を line った. ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト の バ ン ド シ フ ト parsing に よ り FancM は cultivate cells after で に 発 now さ せ た interstate, リ ン acidification modified が up こ っ て い る こ と が Ming ら か に な っ た. Insects ツ ー ハ イ ブ リ ッ ド の is に よ り, Mhfl Rmil と い う タ ン パ ク qualitative と そ れ ぞ れ interaction す る こ と を Ming ら か に し た. FancM が こ の two つ の タ ン パ ク qualitative と interaction す る field は そ れ ぞ れ different な っ て お り, Mhfl と の interaction ド メ イ ン の が, Rmil の そ れ よ り N terminal side で あ っ た. RMil と FancM の interaction に は, RMil に あ る two つ mesh の OB - a fold が must で あ る こ と も Ming ら か に な っ た. Above を ま と め る と, カ イ コ の フ ァ ン コ ニ 経 road で は, ヒ ト の 経 road と similar し た institutions が keep さ れ て い る と think わ れ る.

项目成果

Molecular characterization of the Fanconi anemia protein FancM in silkworm, Bombyx mori

家蚕范可尼贫血蛋白 FancM 的分子特征

• 发表时间: 2010
• 作者: Hiroaki Mon;et al.;管原亮平;管原亮平
• 通讯作者: 管原亮平

カイコにおけるファンコニ経路因子 FancI, D2複合体の解析

家蚕范可尼途径因子 FancI、D2 复合物分析

• 发表时间: 2009
• 作者: Hiroaki Mon;et al.;管原亮平;管原亮平;管原亮平;管原亮平
• 通讯作者: 管原亮平

The Fanconi anemia pathway in silkworm cells

蚕细胞中的范可尼贫血途径

• 发表时间: 2008
• 作者: Hiroaki Mon;et al.;管原亮平;管原亮平;管原亮平;管原亮平;管原亮平
• 通讯作者: 管原亮平

カイコを用いたファンコニ経路因子FancMの機能解析

家蚕范可尼途径因子 FancM 的功能分析

• 发表时间: 2011
• 作者: Hiroaki Mon;et al.;管原亮平
• 通讯作者: 管原亮平

カイコにおけるDNA損傷修復機構ファンコニ経路の解析

家蚕DNA损伤修复机制Fanconi途径的分析

• 发表时间: 2010
• 作者: Hiroaki Mon;et al.;管原亮平;管原亮平;管原亮平
• 通讯作者: 管原亮平