カイコ内在性シャペロンの機能解析とその組み換えタンパク質発現系への応用

家蚕内源伴侣的功能分析及其在重组蛋白表达系统中的应用

• 批准号: 08J03257
• 负责人: 山下 隼
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J03257/
• 关键词: Heat shock factor; heat shock factor like protein; 熱ショック応答; BmHsp90; BmHsp90コシャペロン; カイコホルモンレセプター; 安定化; 転写活性; 核移行; カイコ; タンパク質発現系; 細胞質シャペロン; Hsp90; Cdc37; Fkbp59; Hop; p23

本年度は、Hspの転写活性因子BmHsf1と、他生物には無い、BmHsfllpについての機能を明らかとした。まず、培養細胞を用いて、これらを過剰発現すると、通常のBmHsp70のプロモーター活性がBmHsfl、BmHsfllpそれぞれで、コントロール区と比較して2.5、4倍上昇した。また、これらを過剰発現させた細胞に熱ショックを与え、活性値を経時的に観察した結果、その値に変化は見られなかった。他生物では、Hsflホモログは、通常、不活性化した状態で細胞質に局在しており、熱によって活性化すると共に、核移行し、Hsp geneの発現を促すことが報告されており、BmHsfl、BmHsfllpの性質は他生物と大きく異なる事が予測された。また、細胞内局在解析を行った結果、通常状態から核局在であることが明らかとなった。さらに、これらを恒常的に単独で過剰発現させる細胞を作製し、そのHsp geneの発現量を解析したところ、ほとんどHsp geneの発現量の増加は見られなかった。BmHsfl、BmHsfllpのDNA結合ドメインを用いて作製した活性型変異体を発現させても、恒常的にHsp geneの発現上昇は見られなかった。他生物では、熱ショックによるHsp geneの発現上昇は、Hsflの活性化とDNAの構造変化に制御されることが明らかとなっており、カイコでは特に後者の影響が強いのではないかと考えられた。以上より、カイコではHsfファミリータンパク質が2つ保存されている点、また、熱によって大きく活性化しない点において、カイコ特異的な熱ショック応答の制御機構が存在すると考えられる。その原因の1つとして、エピジェネティクスなHsp geneの発現制御が考えられ、このことは今回研究に用いたHsp geneやHsfがカイコのクロマチン研究の1つのツールになり得る可能性を示唆した。

This year, Hsp activity factor BmHsf1, other organisms, BmHsflp activity factor, BmHsflp activity factor The activity of BmHsp70 was increased by 2.5 or 4 fold in comparison with BmHsfl and BmHsflp. The results of this study were as follows: The properties of other organisms such as BmHsfl, BmHsflp, BmHsflp In the cell, the analysis results, the normal state, the nuclear bureau, the analysis results, and the analysis results. In addition, these constant processes of cell production and analysis of the amount of Hsp gene production have led to an increase in the amount of Hsp gene production. BmHsfl, BmHsfllp DNA binding sites are used to control the development of active variants, and the development of constant Hsp genes is also observed. In other organisms, Hsp gene production increases, Hsfl activation and DNA structural transformation are controlled by the latter's influence. The above-mentioned points, heat and heat are greatly activated, and the specific heat and heat control mechanism exists. The reason for this is that Hsp gene and Hsf are used in the study of Hsp gene and Hsf.

项目成果

カイコシャペロンホモログの機能解析とそのタンパク質発現系への応用

家蚕伴侣蛋白同源物的功能分析及其在蛋白质表达系统中的应用

• 发表时间: 2010
• 期刊: 電子ジャーナルEntomotech 34(掲載決定)
• 作者: 濱岡範光;ら;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;松田知子;松田知子;山下隼・洪善美・李在萬・河口豊・日下部宜宏
• 通讯作者: 山下隼・洪善美・李在萬・河口豊・日下部宜宏

カイコ・ホルモンレセプターに対するBmHSP90コシャペロンの機能解析

家蚕激素受体 BmHSP90 共伴侣蛋白的功能分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 濱岡範光;ら;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;Tomoko Matsuda;松田知子;松田知子;山下隼・洪善美・李在萬・河口豊・日下部宜宏;山下隼・門宏明・光延仁志・沢津橋俊・加藤茂明・李在萬・河口豊・日下部宜宏
• 通讯作者: 山下隼・門宏明・光延仁志・沢津橋俊・加藤茂明・李在萬・河口豊・日下部宜宏