神経細胞の極性形成におけるCRMP-2の制御機構の解析

CRMP-2对神经元极性形成的调控机制分析

• 批准号: 08J04053
• 负责人: 中牟田 信一
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J04053/
• 关键词: 神経細胞; 軸索形成; CaMKKK; CaMKI; CRMP-2; ULK1; S1p1; Rab27; Trk

報告者は神経細胞の外界シグナルによる極性誘導機構の解明と極性形成分子CRMP familyの結合分子の探索に取り組んだ。外界シグナルによる極性誘導機構の解明生体内で神経細胞は、神経栄養因子をはじめとする細胞外因子や細胞接着などの局所的な外界からの情報をもとに極性を獲得すると考えられる。しかしながら、生体内という複雑な環境の中では、細胞外シグナルの解析は非常に困難であった。申請者は細胞の局所にのみ刺激を与える系を確立し、神経栄養因子が未成熟な突起の伸長を促進し、軸索形成を誘導することが判明した。さらに、カルシウムの下流でCaMKKが活性されていることを見出した。活性化型CaMKKを過剰発現させると複数の軸索が形成された。このことは、神経栄養因子の下流でカルシウムというセカンドメッセンジャーが神経細胞の極性化を促進し、軸索形成を誘導することを示唆している。さらにこれらの現象が生体内でも起きているかどうか調べるために、In utero electroporation法(子宮内胎仔への遺伝子導入法)を用いて解析を行った。Trkのドミナントネガティブ体(DN)やCaMKKのDNを過剰発現させたとき、極性化されない細胞の増加や極性化の遅れが認められた。以上の結果は、神経成長因子は神経細胞の極性形成に関与しており、軸索の誘導にはPLC-カルシウム-CaMKIを介したシグナル伝達経路が重要であることを示唆している。CRMP family結合分子の探索CRMP familyは5種類のisoformが存在することが知られている。最近、CRMP isoformの違いによって異なる機能を有していることが報告された。また、isoformの違いによって結合分子が異なることも示されてきた。しかしながら、それらの結合分子はほとんど分かっていない。そこで、5種類のCRMP isoformでrat brain抽出液を用いたaffinity chromatographyを行い、新規結合蛋白質を同定した。その結果638種類の結合分子が同定された。現在そのうちの1つであるERKとCRMP isoform間の結合の意義を明らかにし、どのようにして極性形成に関与しているのか検討中である。

The reporter, from the perspective of the external シグナ による polar induction mechanism <e:1> of the supernatural cell, explained the と polar formation molecule CRMP family <e:1>, combined with the molecular <s:1> exploration に to obtain the <s:1> group んだ. Outside シ グ ナ ル に よ る polarity induced institutional の XieMingSheng で 経 cells は god, god 経 tech students.their ownship raise factor を は じ め と す る extracellular factors や cell then な ど の bureau of な outside か ら の intelligence を も と に polarity を get す る と exam え ら れ る. It is very に difficult であった to analyze であった in vivo と と う う in the 雑な environment <e:1> and extracellular シグナ. Applicants は cells の bureau に の み stimulus を and え る し を established, god 経 tech students.their ownship raise factor が immature な protrusions の induced elongation, axon form を を promote し す る こ と が.at し た. さ ら に, カ ル シ ウ ム の obscene で CaMKK が active さ れ て い る こ と を shows し た. The activated CaMKKを undergoes the occurrence of させると complex many-axis cables が form された. こ の こ と は, god 経 tech students.their ownship raise factor の obscene で カ ル シ ウ ム と い う セ カ ン ド メ ッ セ ン ジ ャ ー が god の 経 cell polarity を promote し and axon form を induced す る こ と を in stopping し て い る. さ ら に こ れ ら が の phenomenon born In vivo で も up き て い る か ど う か adjustable べ る た め に, In utero electroporation method (uterine tube son へ の heritage 伝 son import method) を with い analytical line を っ て た. Trk の ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ body (DN) や CaMKK の DN を before turning 発 now さ せ た と き, polarity さ れ な の raised with や い cell polarization の 遅 れ が recognize め ら れ た. の above results は, god 経 growth factor は 経 cell polarity の form に masato and し て お り, axon の induced に は PLC - カ ル シ ウ ム - CaMKI を interface し た シ グ ナ ル 伝 経 road が important で あ る こ と を in stopping し て い る. The CRMP family, in combination with the molecule <s:1>, explores the existence of the <s:1> 5 types <e:1> isoformが of the CRMP family, する とが とが, and is known to られて る る. Recently, CRMP isoform has been found to have a report on <s:1> によって abnormality なる function を, including <s:1> て る る とが とが された. Youdaoplaceholder0, isoform is in violation of the <s:1> によって combination molecule が is in violation of the なる なる と と されて and されて た. The ながら ながら and それら それら conjugated molecules are ほとん ほとん and <s:1> って and な respectively. Youdaoplaceholder0 で で, 5 kinds of CRMP isoformでrat brain extract を by <s:1> たaffinity chromatographyを line を, new rule binding protein を same as た た. The そ そ result shows that the 638 type of <s:1> binding molecule が is determined to be された. Now そ の う ち の 1 つ で あ る ERK と CRMP isoform の combining の significance between を Ming ら か に し, ど の よ う に し て polarity formation に masato and し て い る の か 検 beg in で あ る.

项目成果

Inositol 1, 4, 5-trisphosphate induced Ca2+ release is involved in neurite outgrowth and neuronal polarization

肌醇 1,4,5-三磷酸诱导的 Ca2 释放参与神经突生长和神经元极化

• 发表时间: 2009
• 作者: 中牟田信一;船橋靖広;上口裕之;貝淵弘三
• 通讯作者: 貝淵弘三

名古屋大学大学院医学系研究科神経情報薬理学講座ホームページ

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Identification of PI 3-kinase as an Slp1-interacting protein in neuron

神经元中 PI 3 激酶作为 Slp1 相互作用蛋白的鉴定

• 发表时间: 2009
• 作者: Otsuka S;Takeyasu K;Yoshimura SH;中牟田信一;船橋靖広
• 通讯作者: 船橋靖広

名古屋大学大学院医学系研究科 神経情報薬理学講座ホームページ

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