神経軸索終末に輸送されるmRNAのクローニング〜軸索形成に関与する因子の解析〜

克隆转运至神经轴突末端的mRNA ~ 轴突形成相关因素分析 ~

基本信息

  • 批准号:
    13780613
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.41万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2001
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2001 至 2002
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究は、胎生期のラット脳において神経細胞の軸索内を輸送されるmRNAの存在を証明することと、それらの配列、構造、機能の検討により、軸索の形成・成熟をもたらす因子、特に未知因子について明らかにすることを目的としている。さらにそれらが神経回路網形成を促進させ得るかどうかを調べ、痴呆に代表される成熟脳の神経機能低下に対し、その回復への応用をはかる。昨年度は、軸索終末サンプルとして成長円錐画分を生化学的方法により分離し、その中のtotal RNAを材料にして任意配列プライマーの組み合わせによるRT-PCRクローニングを行なったが、軸索終末サンプルの純度を高める必要性が示唆された。そこで本年度は初代培養したラット大脳皮質神経細胞の1個から、軸索終末部をマイクロピペットで吸引し、total RNAを抽出し、あらゆる配列のmRNAをクローニングできるprimerを用いたrandom PCR-based cDNA cloning法を組み合わせ、軸索終末に発現するmRNAを網羅的に同定する方法を考案し実行した。(=Single Axonal Teminal-Random cloning)。10個の軸索終末から、軸索に発現するmRNAの候補として12クローンを単離した。それらが軸索に局在することを、in situ hybridizationと、軸索マーカーであるリン酸化型neurofilament-Hに対する免疫染色を組み合わせ検討し、9個のmRNAを同定した。これらはいずれも未知配列でありAxomer-1〜-9(Axonal messenger RNA)と命名した(Gene Bank accession No. ABO97851-ABO97859)。この結果により、これまで軸索内mRNAとして報告されている3つの細胞骨格タンパク質以外にも、軸索終末に局在して何らかの機能を果たすmRNAが、ラットの大脳皮質神経細胞において少なからず存在することを示すことができた。現在、同定されたAxomers mRNAに関して、全長配列のクローニングを進行中である。今後は、(1)コルヒチン処理によるAxomers mRNAの軸索局在の変化の検討、(2)軸索輸送に関わるmRNA自己配列内の特定、(3)輸送に関わる自己内配列に対するantisense oligomerを神経細胞に処理することによる、軸索輸送されるmRNAの機能と意義の解明、に関してさらに実験を重ね、本研究の目的を遂行する。
The purpose of this study is to demonstrate the existence of mRNA in axons of neurons during prenatal development, to investigate the alignment, structure, and function of axons, and to investigate the factors involved in axonal formation and maturation, as well as specific unknown factors. In addition, the formation of neural network is promoted, and dementia is represented by mature neural function deficiency and recovery. In the past year, it was necessary to isolate and synthesize total RNA in the material by biochemical methods, such as RT-PCR, and to improve the purity of axonal terminal protein. This year, the method for extracting total RNA from primary cultured human cortical neurons and for sequencing mRNA from axonal terminals was tested using random PCR-based cDNA cloning. (=Single Axonal Teminal-Random cloning)。10 axonal terminals and 12 axonal mRNA candidates were isolated. 9 mRNA fragments were identified by immunostaining. Axomer-1 ~-9(Axonal messenger RNA) and its name (Gene Bank accession No. ABO97851-ABO97859). The results showed that there was no mRNA in the axonal cells and no mRNA in the cortical cells. Now, we are in the process of identifying Axomers mRNA and full-length alignment. In the future,(1) the study of axonal mRNA transformation in axonal processing,(2) the specification of mRNA self-alignment in axonal transport,(3) the elucidation of the function and significance of axonal mRNA in axonal transport in axonal processing, and the re-examination of the objectives of this study will be carried out.

项目成果

期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Chihiro Tohda: "Comprehensive identifying method for localized mRNAs in single neuronal axons"Journal of Biochemicals and Biophysical Methods. (in press). (2003)
Chihiro Tohda:“单个神经元轴突中局部 mRNA 的综合识别方法”《生物化学与生物物理方法杂志》。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

東田 千尋其他文献

帰脾湯による記憶障害改善作用のメカニズム
kihitoto改善记忆障碍的作用机制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    城屋敷 枝里;内藤 理絵;東田 千尋
  • 通讯作者:
    東田 千尋
神経損傷後の機能回復には 低分子量G蛋白質Rac1を介した アストロサイト制御が関与する
星形胶质细胞通过低分子量 G 蛋白 Rac1 的调节参与神经损伤后的功能恢复
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    甲田 将章;上山 健彦;執行 美智子;近藤 威;久保山 友晴;石井 大嗣;東田 千尋;齋藤 尚亮;甲村 英二
  • 通讯作者:
    甲村 英二
アストロサイト特異的Rac1ノックアウト(KO)による神経損傷後の機能回復促進
星形胶质细胞特异性 Rac1 敲除 (KO) 促进神经损伤后的功能恢复
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    石井 大嗣;上山 健彦;坂本 勲勇;執行 美智子;久保山 友晴;甲田 将章;東田 千尋;甲村 英二;齋藤 尚亮
  • 通讯作者:
    齋藤 尚亮
老化促進モデルマウスの記憶障害に対する柿ポリフェノールオリゴマーの影響
柿多酚低聚物对加速衰老模型小鼠记忆障碍的影响
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    李 英蛾;趙 恩珠;田中 隆;東田 千尋;横澤 隆子
  • 通讯作者:
    横澤 隆子
筋萎縮性側索硬化症モデルマウスを用いた温脾湯の検討
使用肌萎缩侧索硬化症模型小鼠进行 Onsuito 的检查
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    関谷 倫子;田原 愛;一柳 孝司;池城 安正;東田 千尋;横澤 隆子
  • 通讯作者:
    横澤 隆子

東田 千尋的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('東田 千尋', 18)}}的其他基金

頚椎症性脊髄症の機能を軸索修復により根本的に回復する新しい植物性医薬品の開発
开发新植物药,通过轴突修复从根本上恢复脊髓型颈椎病的功能
  • 批准号:
    23K24039
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
サルコペニアや生活不活発病による認知症発症を予防する抗ヘモペキシン戦略
抗血红蛋白策略可预防肌肉减少症和生活方式疾病引起的痴呆症的发生
  • 批准号:
    23K18429
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
頚椎症性脊髄症の機能を軸索修復により根本的に回復する新しい植物性医薬品の開発
开发新植物药,通过轴突修复从根本上恢复脊髓型颈椎病的功能
  • 批准号:
    22H02776
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
新規因子sproutinの神経ネットワーク賦活化と痴呆の改善に及ぼす作用
新因子sproutin对神经网络激活和痴呆改善的影响
  • 批准号:
    11780557
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
アトピー性皮膚炎の痒みに関連した因子の単離、同定および機能解析
特应性皮炎瘙痒相关因素的分离鉴定及功能分析
  • 批准号:
    09771972
  • 财政年份:
    1997
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

相似海外基金

Targeting axonal transport regulation by neurotrophic factors to treat peripheral nerve degeneration
通过神经营养因子调节轴突运输来治疗周围神经变性
  • 批准号:
    MR/Y010949/1
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Fellowship
ナノスプリングと非平衡細胞内力測定法による分子モーター軸索輸送の物性研究
利用纳米弹簧和非平衡细胞内力测量方法研究分子运动轴突运输的物理性质
  • 批准号:
    23K27135
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
シナプス小胞の逆行性軸索輸送機構の統合的解析
突触小泡逆行轴突运输机制的综合分析
  • 批准号:
    23K27165
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
シャペロン介在性オートファジーと軸索輸送に着目した軸索ジストロフィーの病態解明
阐明轴突营养不良的病理学,重点关注分子伴侣介导的自噬和轴突运输
  • 批准号:
    24K09300
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
キネシンKIF1Aによる順行性軸索輸送の分子ネットワーク解明
阐明驱动蛋白 KIF1A 顺行轴突运输的分子网络
  • 批准号:
    23KJ0179
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
疾患特異的ヒトiPS細胞を用いた軸索輸送におけるoptineurinの役割の解明
使用疾病特异性人类 iPS 细胞阐明 optineurin 在轴突运输中的作用
  • 批准号:
    22KJ2329
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
Role of retrograde signaling coupled with anterograde axonal transport in neuronal morphology and its medical applications
逆行信号传导与顺行轴突运输在神经元形态中的作用及其医学应用
  • 批准号:
    23K06814
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Researches on axonal transport by motor proteins based on force measurements by using nano-spring and non-equilibrium statistical physics
基于纳米弹簧和非平衡统计物理力测量的运动蛋白轴突运输研究
  • 批准号:
    23H02442
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
シナプス小胞の逆行性軸索輸送機構の統合的解析
突触小泡逆行轴突运输机制的综合分析
  • 批准号:
    23H02472
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Transsynaptic control of axonal transport in presynaptic assembly and function
突触前组装和功能中轴突运输的跨突触控制
  • 批准号:
    468356
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Operating Grants
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了