場の違いによる胃プロトンポンプの機能変化メカニズムの解明

阐明因场差异引起的胃质子泵功能变化的机制

• 批准号: 08J10617
• 负责人: 藤井 拓人
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: University of Toyama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J10617/
• 关键词: 胃酸分泌細胞; 胃プロトンポンプ; K^+-Cl^-共輸送体; 分泌膜; 脂質ラフト; コレステロール; マイクロドメイン; 胃酸分泌; 細管小胞膜; KCC4; 胃腺; DIOA

胃酸分泌細胞分泌膜における胃プロトンポンプ(H^+,K^+-ATPase)とK^+-Cl共輸送体(KCC4)との機能連関における脂質環境、特に脂質ラフト(コレステロールを豊富に含む膜マイクロドメイン)の役割について研究を行った。ブタ胃粘膜から密度勾配遠心により分泌膜を豊富に含むべシクル(stimulation-associated vesicles;SAV)を単離した。脂質ラフトは、界面活性剤(1%CHAPS)で処理した膜標品を不連続密度勾配遠心により分離し、CHAPS不溶性画分として単離した。SАVにおいてH^+,K^+-ATPaseは脂質ラフト画分と非ラフト画分に存在する一方で、KCC4は脂質ラフト画分にのみ存在していた。SAVのH^+,K^+-ATPase酵素活性およびプロトン分泌能は、methyl-β-cyclodextrin(MβCD)により脂質ラフトを破壊することで顕著に減少し、MβCD処理後の水溶性コレステロール添加による脂質ラフトの再構築で回復した。また、MβCD処理により、脂質ラフト画分に存在したH^+,K^+-ATPaseは非ラフト画分に分布したが、KCC4は非ラフト画分に移行しなかった。H^+,K^+-ATPaseとKCC4の共発現させたHEK293細胞においても、H^+,K^+-ATPaseは、脂質ラフトと非ラフトの両方に分布したが、KCC4は脂質ラフトに高分布していた。以上より、胃酸分泌細胞分泌膜において、H^+,K^+-ATPaseとKCC4は異なる脂質ラフトに存在するにも関らず互いに機能連関しており、KCC4がラフトに存在するH^+,K^+-ATPaseを正に調節していることがわかった。

The functional linkage between H^+,K^+-ATPase and K ^+-Cl cotransporter (KCC4) and secretory membrane of gastric acid secreting cells was studied. The density of the gastric mucosa is closely related to the secretion of the secretory membrane, which contains stimulation-associated vesicles (SAV). Lipid, surfactant (1% CHAPS), membrane standard, density matching, separation, CHAPS insoluble separation S ^V ^+,K^+-ATPase is present in the lipid phase and KCC4 is present in the lipid phase. SAV H^+,K^+-ATPase enzyme activity and secretion can be reduced by methyl-β-cyclodextrin(MβCD), and the lipid chain can be restored by MβCD treatment. H^+,K^+-ATPase is present in the lipid matrix, and KCC4 is present in the lipid matrix. H^+,K^+-ATPase and KCC4 co-exist in HEK293 cells, H^+,K^+-ATPase and lipid molecules are distributed in different directions, while KCC4 is highly distributed in different lipid molecules. The function of H ^+, K ^+-ATPase in secretion membrane of gastric acid secreting cells is related to the existence of lipid molecules in secretion membrane of gastric acid secreting cells.

项目成果

胃壁細胞アピカル膜の酸分泌機構の分子生理

胃壁细胞顶膜泌酸机制的分子生理学

• 发表时间: 2009
• 作者: A. Yoshikawa;et al.;Takashi Iida;酒井秀紀;飯田崇史;富沢直也;吉河朗;富沢真也;藤井拓人;吉河朗;初田真知子;藤田恭輔;富沢真也;藤井拓人;藤井拓人
• 通讯作者: 藤井拓人

酸分泌休止時と刺激時における胃プロトンポンプの性質

休息和刺激酸分泌时胃质子泵的特性

• 发表时间: 2009
• 作者: A. Yoshikawa;et al.;Takashi Iida;酒井秀紀;飯田崇史;富沢直也;吉河朗;富沢真也;藤井拓人;吉河朗;初田真知子;藤田恭輔;富沢真也;藤井拓人;藤井拓人;富沢真也;藤田恭輔
• 通讯作者: 藤田恭輔

Function of KCC4 in the apical membrane of gastric parietal cells.

KCC4 在胃壁细胞顶膜中的功能。

• 发表时间: 2009
• 作者: Fujii;T.
• 通讯作者: T.

KCC3aによるNa^+, K^+-ATPase活性調節機構におけるコレステロールの機能

胆固醇在KCC3a调节Na^+、K^+-ATP酶活性机制中的作用

• 发表时间: 2008
• 作者: A. Yoshikawa;et al.;Takashi Iida;酒井秀紀;飯田崇史;富沢直也;吉河朗;富沢真也;藤井拓人;吉河朗;初田真知子;藤田恭輔;富沢真也;藤井拓人;藤井拓人;富沢真也;藤田恭輔;富沢真也;富沢真也;富沢真也;藤田恭輔;富沢真也;藤井拓人;藤田恭輔
• 通讯作者: 藤田恭輔

The regulation of voltage-dependent TRPP3 channels by cell swelling and pH

细胞肿胀和 pH 值对电压依赖性 TRPP3 通道的调节

• 发表时间: 2009
• 作者: 肖英紀;佐藤峻;枝川圭一;田村隆治;清水貴浩
• 通讯作者: 清水貴浩