KCC3と胃プロトンポンプとの共役による新しい塩酸分泌機構の解明

通过将 KCC3 与胃质子泵耦合来阐明新的盐酸分泌机制

基本信息

项目摘要

K-Cl共輸送体(KCC)の胃における機能はこれまで不明であった。本研究では、胃酸(HCl)の分泌機構におけるK-Cl共輸送体(KCC)の役割を解明することを目的とした実験を行い、以下のような新しい知見を得た。1.ウサギ、ラット、マウスの胃粘膜に発現するKCC3は、KCC3aアイソフォーム(180kDa)であることがわかった。脳のKCC3a(150kDa)のサイズとは異なったが、PNGase F処理によって180kDaおよび150kDaのバンドは共にコアタンパク質である130kDaに収束した。したがって胃酸分泌細胞のKCC3aは固有の糖鎖付加を受けているものと考えられた。2.ラット胃粘膜切片の免疫組織染色を行ったところ、胃酸分泌細胞においてKCC3aはNa^+,K^+-ATPaseの分布と一致し、H^+,K^+-ATPaseの分布とは異なったことから、KCC3aは基底側膜に局在することがわかった。3.テトラサイクリン処理によりKCC3aを安定発現させることができるT-Rexシステム導入細胞を構築した。興味深いことにKCC3aの発現により、Na^+,K^+-ATPaseの発現量が変化しないにもかかわらず、ATP加水分解活性は有意に上昇した。したがってKCC3aはNa^+,K^+-ATPaseと機能的に共役している可能性が考えられた。4.ラット、マウスの胃粘膜に新たにKCC4(160kDa)が発現していることを見出し、免疫組織染色によりKCC4は胃酸分泌細胞分泌膜においてH^+,K^+-ATPaseと共存することがわかった。KCC4は、胃酸分泌能の発達している胃腺上部の細胞に高発現していることから、KCC4の胃酸分泌機構への関与が示唆された。以上のことから、KCC3aおよびKCC4が関与する新しい胃酸分泌のスキームが考えられた。
The function of K-Cl cotransporter (KCC) is unknown. In this study, the mechanism of secretion of gastric acid (HCl) and K-Cl cotransporter (KCC) were investigated. 1. KCC3, KCC3a, KCC3b, KCC3c, KCC3b, KCC3c, KCC3c, KCC3c KCC3a(150kDa) is treated with PNGase F, and the 180kDa protein is treated with PNGase F. KCC3a is an intrinsic part of gastric acid-secreting cells. 2. The distribution of Na^+,K ^+-ATPase in gastric mucosa sections was consistent with that in gastric acid secreting cells, but the distribution of H^+,K^+-ATPase was different from that in gastric mucosa sections. 3. T-Rex system was constructed by KCC3a system. KCC3a production, Na^+,K^+-ATPase production and ATP hydrolysis activity increased. KCC3a is a Na^+,K^+-ATPase. 4. KCC4 (160kDa) was found in gastric mucosa, and KCC4 was found in secretory membrane of gastric acid secreting cells by immunohistochemical staining. KCC4 is the key to the secretion of gastric acid in the upper gastric gland. KCC3a, KCC4 and KCC 3b are related to gastric acid secretion.

项目成果

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Association of paracellin-1 with ZO-1 augments the reabsorption of divalent cations in renal epithelial cells
  • DOI:
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
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  • 通讯作者:
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Is the ClC-2 chloride channel involved in the Cl- secretory mechanism of gastric parietal cells?
  • DOI:
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  • 发表时间:
    2004-09-24
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3.5
  • 作者:
    Hori, K;Takahashi, Y;Sakai, H
  • 通讯作者:
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Effects of the anti-cancer drug gefitinib on Cl^- secretion in isolated rat colon.
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
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  • 通讯作者:
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  • DOI:
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  • 发表时间:
    2004-04-09
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3.5
  • 作者:
    Sakai, H;Suzuki, T;Takeguchi, N
  • 通讯作者:
    Takeguchi, N
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  • 作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    Kobayashi S.;et. al.;酒井 秀紀;Asano S. et al.;Fujii T. et al.;Sakai H. et al.;Tabuchi Y. et al.;Tabuchi Y. et al.;酒井 秀紀;森井 孫俊;酒井 秀紀;藤井 拓人;高橋 佑司;高橋 佑司;藤井 拓人;山内 理嗣
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  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    樋口 大河;清水 貴浩;藤井 拓人;Nilius Bernd;酒井 秀紀
  • 通讯作者:
    酒井 秀紀

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