新規生物防除法の確立を目指した牧草共生菌と近縁病原菌の感染機構の比較解析

草类共生菌与近缘病原菌侵染机制对比分析，建立新的生物防治方法

• 批准号: 08J40055
• 负责人: 竹本 愛子 (田中 愛子)
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J40055/
• 关键词: 共生; 植物病原菌; 転写制御因子

1.ProAのEfESDCプロモーターへの結合性先に,牧草共生菌Epichloe festucaeにおいて宿主植物との共生確立に必須なZn(II)2Cys6タイプの転写制御因子をコードするEfPROAを同定した。さらに、EfPROA破壊株において、Aspergillus nidulansの有性生殖に必須なesdCの相同遺伝子EfESDCの転写レベルが顕著に低下し、EfESDCがPROAの下流遺伝子であると推定された。マルトース結合タンパク(MBP)とProAの融合タンパク(MBP-ProA)を大腸菌で発現し、精製した。ゲルシフトアッセイ法を用いて、MBP-ProAのEJESDCのプロモーター配列への結合活性を調査したところ、MBP-ProAが、EfESDC開始コドンから631bP上流の配列GCGCCGに結合することが明らかとなった。本年度は、MBP-ProAが、EfESDC開始コドンから1140bp上流の配列GGCGCにも結合することを明らかにし左。さらに、EfESDCのプロモーター制御下の緑色蛍光タンパク質(GFP)の発現を調査し、GFPの高発現には、140bp上流の配列GGCGCが必須であることが明らかとなった。2.クロマチン免疫沈降(ChIP)法を用いたE.festucaeのProAに制御される遺伝子群の解析ProAとGFPとの融合タンパク(ProA-GFP)発現ベクターを構築し、E.festucae野生株に導入した。得られた形質転換体においてProA-GFPが核に局在していることをGFP蛍光の観察により確認した。転写因子をクロマチンに固定した形質転換体から免疫沈降によってProA-GFPとともに結合したDNA断片を抽出した。リアルタイムPCR法により、抽出したDNA断片中にEfESDCプロモーターを含む複数のプロモーター配列が高濃度で存在することが明らかとなった。

1. ProA の EfESDC プ ロ モ ー タ ー へ の associativity に first, grasses symbiotic Epichloe festucae に お い て host plants と の symbiotic must establish に な zinc (II) 2 cys6 タ イ プ の planning write suppression factor を コ ー ド す る EfPROA を with fixed し た. さ ら に, EfPROA 壊 strains に お い て, Aspergillus nidulans の sexual reproduction に must な esdC の same heritage 伝 son EfESDC の planning write レ ベ ル が 顕 low に し, EfESDC が PROA の dirty legacy 伝 son で あ る と presumption さ れ た. マ ル ト ー ス combining タ ン パ ク (MBP) と ProA の fusion タ ン パ ク (MBP - ProA) を coliform で 発 し, refined し た. ゲ ル シ フ ト ア ッ セ を イ method with い て, MBP ProA の EJESDC の プ ロ モ ー タ ー match column へ の binding activity を survey し た と こ ろ, MBP ProA が, EfESDC began コ ド ン か ら 631 bp upstream の match column GCGCCG に combining す る こ と が Ming ら か と な っ た. は this year, the MBP - ProA が, EfESDC began コ ド ン か ら 1140 bp upstream の match column GGCGC に も combining す る こ と を Ming ら か に し left. さ ら に, EfESDC の プ ロ モ ー タ ー の 蛍 green light under the system of imperial タ ン パ ク mass (GFP) の 発 し を investigation, GFP の high 発 now に は, 140 bp upstream の match column GGCGC が must で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. 2. ク ロ マ チ ン immune sink を (ChIP) method with い た E.f estucae の ProA に suppression さ れ る heritage 伝 subgroup の parsing ProA と GFP と の fusion タ ン パ ク (ProA - GFP) 発 now ベ ク タ ー を constructing し, E.f estucae wild strains に import し た. Have ら れ た form quality planning in body に お い て ProA - GFP が nuclear に bureau in し て い る こ と を GFP 蛍 light の 観 examine に よ り confirm し た. Planning to write factor を ク ロ マ チ ン に fixed し た form quality planning in body か ら immune sink に よ っ て ProA - GFP と と も に combining し た DNA fragment を spare し た. リ ア ル タ イ ム PCR method に よ り, drew し た DNA fragment に EfESDC プ ロ モ ー タ ー を containing む plural の プ ロ モ ー タ ー match column が exist high concentration で す る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Identification of a transcription factor regulating hyphal differentiation and growth in Epichloe festucae, a mutualistic symbiont of temperate grasses

温带草互利共生体羊茅中调节菌丝分化和生长的转录因子的鉴定

• 发表时间: 2009
• 作者: Nagaoka;C.;Kuwabara;T.;Watabe;M.;Yoshikawa;S.;田中愛子;竹本大吾;竹本大吾;田中愛子;田中愛子
• 通讯作者: 田中愛子

Polarity proteins Bem1 and Cdc24 are components of the filamentous fungal NADPH oxidase complex

• DOI: 10.1073/pnas.1017309108
• 发表时间: 2011-01
• 期刊: Proceedings of the National Academy of Sciences
• 作者: D. Takemoto;S. Kamakura;Sanjay Saikia;Y. Becker;Ruth E. Wrenn;A. Tanaka;H. Sumimoto;B. Scott

ペレニアルライグラス共生菌Epichloe festucaeのProAが結合するプロモーター配列の同定

多年生黑麦草共生真菌Epichloe festucae中ProA结合的启动子序列的鉴定

• 发表时间: 2011
• 作者: Nagaoka;C.;Kuwabara;T.;Watabe;M.;Yoshikawa;S.;田中愛子;竹本大吾;竹本大吾;田中愛子
• 通讯作者: 田中愛子

牧草共生糸状菌の共生確立機構-活性酸素生成の役割について

草类共生丝状真菌的共生建立机制——活性氧产生的作用

• 发表时间: 2008
• 作者: 細川 卓也・小松 秀雄・前田 幸二;中村和洋・吉田 徹志・福元 康文;木戸一孝・古谷綾子・落合弘和・松本洋司・松本大雪・瀧川雄一;竹本 大吾;竹本 大吾
• 通讯作者: 竹本 大吾