权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ミオシンVの正確な歩幅決定プロセスのマイクロ秒追跡

微秒级跟踪肌球蛋白V精确步长测定过程

基本信息

批准号：
20770121
负责人：
西川宗
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20770121/
关键词：
ミオシンV ミオシンVI 暗視野顕微鏡金粒子分解能ハロタグ A

项目摘要

本年度の研究目標は「新しい暗視野顕微鏡法の時空間分解能の評価と改善」および「金粒子の固定法の確立」であった. 第1の目標に関しては, 我々は全反射照明を応用した新しい暗視野顕微鏡技術を確立しスペックルや干渉縞の問題を解決した. 結果, 40nmの金プローブでは100μ秒, 80nmでは10μ秒の時間分解能でオングストローム単位の空間分解能を実現した. 第2の目標に関しては, ミオシンVのモータードメイン(N末端)にハロタグを用いたビオチンラベル法を確立し, アビジン標識した金プローブを効率よく結合することが可能になった. これらを用いて歩幅決定プロセスのマイクロ秒追跡を行い, 以下が明らかになった.ミオシンVは80nmのステップを実現するために, まず50nm地点で16m秒だけ停留し±40nmの範囲をくまなく探索する. 停留地点から30nm先の最適位置を検出した後は, 300μ秒以内にステップ反応を終了する. 同様の方法論を用いて, ミオシンVIは2種類のフォワードステップをもつことが明らかになった. 80nmステップは50nm地点で停留し, 40nmステップは10nm地点で停留する. これはミオシンVIの軸足の向きが2種類存在することを意味し, 同時にバックステップを含む多彩な歩行様式メカニズムも明らかになった.

The objectives of this year's research are "evaluation and improvement of time-space decomposition performance of new darkfield microscopy" and "establishment of fixation method of gold particles". The first goal is to solve the problem of total reflection illumination by using new dark-field micro-mirror technology. As a result, the temporal resolution energy of 40nm gold foil was 100μ s, and the spatial resolution energy of 80nm foil was 10μ s. The second goal is to establish the relationship between the V and the N terminal, and to establish the relationship between the V and the N terminal. The following is a summary of the steps used to determine the size of the search engine. The temperature of 80nm is detected at 50nm and stays at ±40nm for 16m seconds. Stop position: 30nm, first optimum position: 300μ s, second optimum position: 300μ s. The same methodology was used to develop, develop, and develop two types of software. 80nm stops at 50nm, 40nm stops at 10nm. There are two kinds of axial legs in the shaft of the shaft, and there are two kinds of axial legs in the shaft.